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目前癌症是人类健康最大的威胁,也是我国目前人口死亡比例最高的疾病之一。已有研究表明癌症的形成、发展及治疗过程都与自由基密切相关。与自由基代谢有关的过氧化物酶,以及对自由基具有清除作用的抗氧化剂花青素,在心里美萝卜(Raphanussativus var.nigor Brassicaceae)中含量较为丰富。本文主要对心里美萝卜中花青素的提取及抗氧化性进行了研究,为其作为一种新的抗癌剂使用提供一定的依据。
通过比较H2O,0.1%HCl,0.05%H2SO4和含0.1%HCl的乙醇四种浸提液的浸提效果发现,0.1%HCl浸提心里美萝卜花青素效果最好:用AB8,D101,HP20三种大孔吸附树脂对花青素的0.1%HCl浸提液进行纯化,从吸附剂量和解吸附率上来看AB8对心里美萝卜花青素的纯化比较合适;花青素在磷酸缓冲液中较稳定;在一定浓度范围内的Ve3+对心里美萝卜花青素具有一定的稳定作用;通过ABTS+实验对花青素的抗氧化性进行研究发现,心里美萝卜花青素具有较强自由基清除能力;通过Fe3+还原性实验发现,从心里美萝卜提取得到的花青素具有一定的还原性;心里美萝卜花青素单独作用于DNA时,对DNA没有损伤作用;在Cu(II)/H2O2组成的对质粒DNA的OH损伤体系中,花青素的加入进一步促进了质粒DNA的损伤;花青素与Cu(II)作用之后可以造成质粒DNA的损伤,EDTA,HRP,CAT可以抑制这种损伤;光谱扫描发现,花青素分别和Cu(II),H2O2及Cu(II)/H2O2作用后,在可见光区峰值下降,紫外光区峰值上升,说明花青素在它们作用下发生一定的变化,而这种变化与其对DNA损伤的作用可能有一定的相关性:MTT实验表明,心里美萝卜花青素对Bel-7402肝癌细胞活性有一定的抑制作用;大肠杆菌实验揭示,心里美萝卜花青素在一定程度上可以减弱H2O2对大肠杆菌的损伤。由此可见:用0.1%HCl浸提心里美萝卜花青素效果较好,用AB8纯化效率较高;并且心里美萝卜花青素既对H2O2损伤的大肠杆菌有一定保护作用的同时,又对肝癌细胞的活性有一定的抑制作用,所以花青素具有抗氧化性和过氧化性双重作用。