研究背景:随着人口老龄化的到来以及不良生活方式的流行,心血管疾病的发生率逐年增高,而慢性心力衰竭是多种心血管疾病共同终末期表现。其中心肌纤维化（Myocardial fibrosis,MF）是发展致慢性心力衰竭的重要病理基础。心肌纤维化病理机制是在高血压、心肌梗死等病理因素刺激下,心肌成纤维细胞（CardiacFibroblasts,CFs）大量激活并转化成肌成纤维细胞,分泌过量细胞外基质（extracellular matrix,ECM）,导致胶原蛋白比例失调。TGF-β1是调控心肌纤维化的重要生长因子,通过细胞内蛋白Smad2/3、ERK1/2转导信号。在小鼠表皮纤维化的研究中,TGF-β1和CCL₇都有促纤维化作用并存在交互作用（cross-talking）。最新研究发现,在醛固酮致心肌纤维化过程中CCL,表达量增加。但CCL₇是否促心肌纤维化发展,及其与TGF-β1是否具有交互作用尚不清楚。研究目的:本研究旨在细胞水平上,探究CCL₇致心肌纤维化的信号通路,以及探究与TGF-β1交互机制。研究方法:取10只出生1-3天SD乳鼠,酶消化法和差速贴壁法获取心脏成纤维细胞（CFs）。免疫荧光鉴定CFs。Western Blot检测TGF-β 1和CCL₇最佳干预浓度。Elisa法筛选下调CCL₇或 TGF-β 1效率高的病毒。将CFs随机分成对照组（NC组）;外源性TGF-β 1干预组（T组）;空病毒转染对照+外源TGF-β 1干预组（T+V组）;CCL₇ SiRNA+外源TGF-β 1干预组（T+C SiV组）;外源CCL₇干预组（C组）;空病毒转染对照+外源CCL₇干预组（C+V组）;TGF-β1 SiRNA+外源CCL₇干预组（C+TSiV组）。根据分组给予相应病毒转染,后给予药物干预。RT-PCR检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量。WesternBlot检测细胞内信号蛋白Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。CCK8检测各组细胞增殖水平。研究结果:免疫荧光鉴定显示CFs纯度高（Vimentin抗原和FSP-1抗原表达阳性率95%以上,TroponinT抗原表达阳性率3%以下）。WesternBlot检测显示TGF-β 1干预浓度4ng/ml最佳,CCL₇干预浓度200ng/ml时最佳。Elisa法检测显示TGF-β1-SiRNA3、CCL₇-SiRNA1下调效率最高。与对照组相比,TGF-β1干预组,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均增高（P<0.05）,细胞增殖水平也增高（P<0.05）。但与TGF-β1干预组相比,CCL₇ SiRNA+外源TGF-β1干预组中,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均降低（P<0.05）,细胞增殖水平也降低（P<0.05）。与对照组相比,CCL₇干预组Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均增高（P<0.05）,细胞增殖水平也增高（P<0.05）。但与CCL₇干预组相比,TGF-β1SiRNA+外源CCL₇干预组中,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）,细胞增殖水平也无明显变化（P>0.05）。研究结论:1.CCL₇在 TGF-β 1致心肌纤维化信号通路中起关键作用,下调CCL₇能够改善TGF-β 1致心肌纤维化。2.CCL₇能够独立致心肌纤维化,且通过细胞内信号蛋白Smad2/3、ERK1/2 起作用。