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一、研究背景与目的心脏骤停后综合征是一种独特的、复杂的多种病理损伤的集合,包括脑损伤、心肌功能紊乱以及系统性缺血/再灌注应答。心脏骤停后脑损伤是复苏后患者致残、致死的主要原因,在临床中,我们将之称为成人“缺血缺氧性脑病”(HIE)。然而,目前对该疾病病理机制的研究及可行的干预措施仍然十分有限。近年来有研究发现剧烈的炎症反应是导致复苏后脑损伤的主要原因之一。高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种可诱导强烈炎症反应的细胞因子,在多种炎症相关疾病中发挥重要作用,是减少神经系统炎症和脑损伤的理想靶标,但其在CA/CPR引起脑损伤中的作用不清楚。本研究的目的是观察HMGB1在CA/CPR后血清中的变化及阻断HMGB1是否存在脑保护作用,此对寻找合适的药物作用靶标、治疗该疾病并减少该病死亡率具有重要意义。二、研究方法1、采用雄性SD大鼠的8分钟窒息性心脏骤停模型。2、使用ELISA试剂盒检测CA/CPR后患者及大鼠血清中HMGB1 水平。3、研究阻断HMGB1是否具有脑保护作用。我们将动物随机分为四组:假手术组、模型组(CA/CPR)、假肽组(Scramble)、结合肽组(HBHP),后两组于复苏成功后30min经股静脉给药。随后对大鼠7天生存率、神经功能(NDS量表)、神经元丢失(尼氏染色)、胶质细胞活化(免疫组化染色)、脑组织炎症因子表达水平(PCR/Westernblot)指标进行观察。4、研究HMGB1作用的机制。我们在窒息前将动物随机分为两组,分别经侧脑室给予TAK-242(TLR4特异性抑制剂)及二甲基亚砜(溶媒),随后观察组织学损伤及相关蛋白表达。三、研究结果1、CA/CPR后患者及大鼠血清中HMGB1水平升高CA/CPR组患者及动物血清HMGB1水平均分别明显高于健康对照组及sham 组(P<0.01)。2、HBHP治疗提高CA/CPR后大鼠生存率,并具有脑保护作用HBHP治疗组大鼠7天生存率显著高于假肽组(80.77%vs 53.85%,P<0.05)。此外,HBHP治疗能显著改善CA/CPR后第1、3、7天神经功能缺损(P<0.05,P<0.01,P<0.05)、降低第 7 天海马 CA1 区神经元(38±3vs18±3,P<0.001)及树突丢失(P<0.05)、抑制第7天海马CA1区及皮质区小胶质细胞(P<0.001)及星形胶质细胞活化(P<0.001,P<0.01)、降低CA/CPR后6h海马区IL-1β、皮质区TNF-a的mRNA水平以及海马区iNOS及COX-2蛋白表达水平(P<0.05)。3、TAK-242抑制CA/CPR后大鼠海马CA1区神经元丢失及NF-κB的活化与溶媒组相比,TAK-242减少了 CA/CPR后海马CA1区神经元(54±6vs28±3,P<0.01)及树突丢失(P<0.05),并部分抑制了海马区NF-κBP65的活化。四、结论1、HMGB1在CA/CPR后患者及大鼠血清中大量释放。2、HBHP可提高CA/CPR后大鼠7天生存率,并产生脑保护作用。3、阻断TLR4可减少CA/CPR后神经元损伤、抑制NF-κB活化,提示HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应可能参与了 CA/CPR后脑损伤,此发现为今后以HMGB1作为靶点治疗或改善缺血缺氧脑病提供了理论基础。