从免疫炎症探索脾虚失眠证候变化及补脾胃泻阴火升阳汤干预作用

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目的:1.通过比较脾虚型非失眠、脾虚型失眠与脾虚胃热型失眠者细胞因子水平,尝试从免疫炎症角度探索脾虚失眠的证候变化特点。2.观察补脾胃泻阴火升阳汤干预脾虚胃热型失眠的疗效、安全性及其对细胞因子的影响,从免疫炎症角度探讨其疗效机制。方法:研究一:以脾虚型非失眠、脾虚型失眠和脾虚胃热型失眠人群作为研究对象,于广东省中医院招募受试者。分别采用匹兹堡睡眠质量指数评分(Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI)量表、失眠严重指数评分(Insomnia Severity Index,ISI)量表评估以上三组患者的睡眠质量以及采用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法测量三组促炎因子白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、肿瘤坏死因子-β(Tumor Necrosis Factor-β,TNF-β),抗炎因子白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)和抗病毒因子干扰素-α(Interferon-α,IFN-α)的血清浓度。研究二:选取脾虚胃热型失眠组予补脾胃泻阴火升阳汤干预28天,采用PSQI、ISI量表及多导睡眠监测(Polysomnography,PSG)评估该方对脾虚胃热型失眠的疗效,通过分析不良事件及检验指标评价该方的安全性,并采用ELISA法测量促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、TNF-β,抗炎因子IL-10和抗病毒因子IFN-α的血清浓度以探讨其疗效机制。结果:研究一:从免疫炎症角度探索脾虚型非失眠、脾虚型失眠和脾虚胃热型失眠三组之间的变化特点共纳入病例101例,其中脾虚型非失眠组有34例,脾虚型失眠组40例,脾虚胃热型失眠组27例。1.睡眠质量脾虚型非失眠组、脾虚型失眠组和脾虚胃热型失眠组的PSQI总分分别为5.12±1.65、13.78±2.14、13.70±2.48 分,ISI 总分分别为 3.59±3.26、20.20±4.77、20.85±4.11分,可见,脾虚型非失眠组无临床失眠,脾虚型失眠组和脾虚胃热型失眠组均为中度失眠。2.细胞因子血清浓度水平(1)促炎因子脾虚型非失眠组、脾虚型失眠组与脾虚胃热型失眠组三组促炎因子IL-1β血清浓度差异有统计学意义(P<0.05),脾虚型非失眠组→脾虚型失眠组→脾虚胃热型失眠组的趋势呈递进升高;三组促炎因子IL-6、TNF-α、TNF-β血清浓度差异无统计学意义(P>0.05),但TNF-α及TNF-β在脾虚型非失眠组→脾虚型失眠组→脾虚胃热型失眠组呈递进升高趋势。两两比较中,脾虚胃热型失眠组在IL-1β上较脾虚型非失眠组显著升高(P<0.05);脾虚型失眠组在IL-6上较脾虚胃热型失眠组显著升高(P<0.05)。可见,脾虚胃热型失眠组的IL-1β、TNF-α、TNF-β在三组中处于最高状态,脾虚型失眠组的IL-6在三组中处于最高状态。(2)抗炎因子三组抗炎因子IL-10血清浓度差异无统计学意义(P>0.05),但可见两失眠组IL-10均较非失眠组有升高趋势,其中,脾虚型失眠组IL-10在三组中处于最高水平。(3)抗病毒因子三组抗病毒因子IFN-α血清浓度差异有统计学意义(P<0.05),脾虚型非失眠组→脾虚型失眠组→脾虚胃热型失眠组的趋势呈递进升高。两两比较中,脾虚胃热型失眠组在IFN-α上较脾虚型非失眠组和脾虚型失眠组均显著升高(P<0.05)。3.细胞因子之间的相关性IL-1β 与 TNF-α、TNF-β、IFN-α,TNF-α 与 TNF-β,IL-6 与 IL-10,IFN-α与TNF-α、TNF-β在三组中均有显著线性正相关(P<0.05)。IL-6与TNF-α仅在非失眠组(脾虚型非失眠组)有显著线性负相关(P<0.05);IL-6与TNF-β、IL-10与IFN-α在俩失眠组(脾虚型失眠组和脾虚胃热型失眠组)均有显著线性正相关(P<0.05)。IL-1β与IL-10、IL-6与IFN-α、TNF-β与IL-10仅在脾虚胃热型失眠组有显著线性正相关(P<0.05)。其余炎症因子(IL-1β与IL-6、TNF-α与IL-10)在三组均未见显著线性相关性(P>0.05)。4.PSQI总分与细胞因子的相关性三组PSQI总分与各细胞因子血清浓度之间均无显著线性相关性(P>0.05)。研究二:从免疫炎症角度探索补脾胃泻阴火升阳汤干预作用临床研究共纳入脾虚胃热型失眠病例27例,完成干预前后两次PSG的为12例,完成停止干预后随访的为19例。1.疗效评价:睡眠质量(1)主观睡眠质量:PSQI分数和ISI分数经4周补脾胃泻阴火升阳汤干预后,PSQI总分较干预前显著下降(P<0.05),其中因子分主观睡眠质量分数、睡眠潜伏期分数、使用睡眠药物总分、睡眠持续性分数与干预前相比显著下降(P<0.05),习惯性睡眠效率总分、白天功能紊乱总分、睡眠紊乱总分与干预前相比差异无统计学意义。ISI总分与干预前相比显著下降(P<0.05)。(2)客观睡眠质量:PSG检查经4周补脾胃泻阴火升阳汤干预后,PSG各项与干预前相比差异均无统计学意义(P>0.05),其中,总睡眠时间、睡眠清醒持续时间、睡眠总清醒次数、N2总睡眠时间百分比较干预前呈下降趋势,睡眠潜伏期、睡眠效率、N1总睡眠时间百分比、N3总睡眠时间百分比、REM总睡眠时间百分比较干预前呈上升趋势。2.安全性评价(1)检验检查指标本研究中出现的指标异常主要体现在血常规、肝功能、二便常规及心电图异常。其中,1例白细胞计数下降,2例血红蛋白含量下降,1例血小板计数升高;4例转氨酶稍升高;2例尿潜血升高,1例尿白细胞升高,1例尿酸升高;1例粪便潜血升高;3例窦性心动过缓,2例窦性心率不齐,1例偶发房性早搏。(2)不良事件研究中无严重不良事件。研究中有2例轻度不良事件,均为消化道症状,在干预结束前均好转痊愈。3.疗效机制:干预后细胞因子血清浓度的改变经4周补脾胃泻阴火升阳汤干预后,促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α及抗炎因子IL-10与干预前相比显著上升(P<0.05);促炎因子TNF-β、抗病毒因子IFN-α与干预前相比差异无统计学意义(P>0.05),呈下降趋势。结论:1.三组在细胞因子血清浓度水平和细胞因子间的相关性呈现出某些特点及变化趋势:(1)脾虚证型(脾虚型非失眠、脾虚型失眠、脾虚胃热型失眠)中,IL-1 β与TNF-α、IL-1β 与 TNF-β、IL-1 β 与 IFN-α,TNF-α 与 TNF-β,IL-6 与 IL-10,IFN-α与TNF-α、IFN-α与TNF-β呈正相关。(2)非失眠人群(脾虚型)IL-6与TNF-α呈负相关。(3)失眠患者(脾虚型和脾虚胃热型)IL-6与TNF-β、IL-10与IFN-α呈正相关;高浓度的促炎因子IL-6和抗炎因子IL-10可能是脾虚型失眠的炎症特点之一;低浓度的促炎因子IL-6和抗炎因子IL-10可能是脾虚胃热型失眠的炎症特点之一,并且IL-1β与IL-10、IL-6与IFN-α、TNF-β与IL-10呈正相关。(4)脾虚型非失眠→脾虚型失眠→脾虚胃热型失眠的发展过程中,炎症症状呈逐步加重表现,免疫激活程度可能也逐步加重,脾虚型失眠组可能呈现出免疫炎症反应激活状态,脾虚胃热型失眠可能处于免疫炎症过亢状态,体现在促炎因子IL1-β、TNF-α、TNF-β和抗病毒因子IFN-α血清浓度呈组间递增趋势。2.补脾胃泻阴火升阳汤干预脾虚胃热型失眠,对于主客观睡眠质量,均有明显改善作用。其改善作用可能与增强脾虚胃热型失眠患者的抗炎能力、缓解其体内过亢的免疫炎症反应,调节细胞因子浓度以使体内炎症状态达到平衡相关。
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