目的研制早期快速检测抗肠道病毒71型(EV71)抗体的ELISA血清学诊断性试剂盒,评价其临床应用价值。方法将表达纯化的EV71重组蛋白VP1作为包被抗原,建立EV71型手足口病间接ELISA法的血清学检测方法。通过与逆转录(RT)PCR方法、EV71病毒分离试验和微量血清中和试验比较,评价抗-EV71 IgM和抗-EV71 IgG血清学诊断方法在EV71型手足口病的诊断价值,并进行临床考评。结果与RT-PCR比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83%,85%,81%和87%;抗-EV71 IgG敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为72%,74%,68%和77%。与EV71病毒分离方法比较,抗-EV71 IgM敏感度、特异度分别为85%和97%;抗-EV71 IgG敏感度、特异度分别为75%和77%。通过直线相关分析发现,抗-EV71 IgG抗体滴度和中和抗体滴度呈显著正相关(r =0.72,P<0.001)。EV71型手足口病患儿恢复期血清抗IgG滴度较急性期升高(P<0.001),但抗IgM滴度差异无统计学意义(P=0.287)。重复试验变异系数小于10%。临床100份样本检测,抗EV71IgM抗体灵敏度与特异度均超过85%。试剂放置4周后,检测结果稳定。结论利用VP1重组蛋白作为包被抗原,成功开发ELISA检测人血清抗-EV71 IgM和抗-EV71 IgG抗体的诊断试剂盒。