论文部分内容阅读
背景:唐氏综合征(Down Syndrome,DS),在小儿常染色体畸变性所导致的出生缺陷类疾病中最为常见的。该病在新生儿中的发病率极高,患者往往表现为先天性智力低下、面容特殊,身体发育迟缓,并伴随有先天性心脏病、免疫力低下、白血病等多种疾病,DS患者生活往往不能自理,社会适应和劳动能力较差,给家庭乃至社会都带来了沉重的负担。该病尚无有效的治疗手段,主要依赖于产前诊断与产前筛查以减少唐氏综合征患儿的出生。然而传统的产前筛查漏检率和假阳性较高。产前诊断如通过羊膜腔穿刺、绒毛膜取样、脐带取血等方法获得胎儿细胞进行培养,进而进行染色体核型分析是产前诊断唐氏综合征的金标准,但均具有创伤性,易导致出血、感染和流产等并发症。因此,寻找新的生物标志物,以开发出一种非侵入性、检出率高的筛查唐氏综合征胎儿的检查方法显得非常迫在眉睫。目的:在孕妇外周血血浆中,利用Western Blot技术对DS胎儿脐带血血浆与健康胎儿脐带血血浆中差异表达的蛋白在母亲血中进行验证,以期得到新的唐氏综合征(DS)产前筛查标志物,建立新的无创性产前诊断方法。方法:通过穿刺脐带取样的方法,对2013年4月至2014年1月期间到深圳市人民医院以及中国人民解放军第一八一医院进行产前筛查的唐氏综合征疑似或者高危孕妇,采用常规G显带染色体核型分析以及FISH技术做进一步确诊。收集期间经常规G显带染色体核型分析及FISH技术确诊为DS胎儿的孕妇的外周血8例和正常胎儿的孕妇外周血8例,分离血浆;结合临床特性,选择在DS胎儿脐带血血浆与健康胎儿脐带血血浆中表达差异的蛋白作为候选特异性标志蛋白,采用Western Blot技术对候选标志物进行分析验证。结果:G显带分析及FISH检测确定了胎儿的染色体数目,其中8例21号染色体数目异常以及8例正常的参与本研究的验证实验;Apolipoprotein E、ERO1-like protein alpha、Serum amyloid P-component、Complement factor B、2-oxoglutarate dehydrogenase-like、Nucleosome assembly protein 1-like 1、Thymosin beta-10在孕DS胎儿孕妇外周血血浆中的表达均属于上调蛋白,与健康对照组相比,表达量较高,与在DS胎儿脐带血血浆中的结果一致。结论:ApolipoproteinE、ERO1-like protein alpha、Serum amyloid P-component、Complement factor B、2-oxoglutarate dehydrogenase-like、Nucleosome assembly protein 1-like 1、Thymosin beta-10均属于上调蛋白,可作为唐氏综合征潜在的产前诊断蛋白标志物。这些标志性蛋白或许可以进一步揭示唐氏综合征的发病机制。