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背景与目的 dUTP焦磷酸酶(deoxyuridine triphosphate nucleotedohydrolase，dUTPase)是体内一种重要的水解酶，基本功能是把dUTP水解成dUMP和焦磷酸(pyrophosphoric acid，PPi)，不但可为DNA的合成提供原料，还可降低细胞内dUTP的浓度以降低DNA突变的频率，维持细胞遗传的稳定。dUTPase编码两种同工酶：线粒体型DUT-M和细胞核型DUT-N，DUT-M在非分裂、代谢活跃的细胞内表达，DUT-N则受细胞周期的调节。dUTPase在细胞内的表达依赖于细胞周期的调节，分化能力高的细胞dUTPase活性相对水平较高，处于分化后期或不分化的细胞的dUTPase活性则较低。对大肠癌的研究发现大肠癌细胞SW620的dUTPase的活性比HT29高4.4倍，而大肠癌细胞HT29转染dUTPase基因后活性增加，表现出对FUdR的耐药性。siRNA可剂量和时间依赖性地抑制大肠癌细胞株SW620的dUTPase的活性，伴随细胞繁殖减慢。临床上发现dUTPase低表达的大肠癌患者对治疗的效果及生存期均优于高表达者，原发性大肠癌无淋巴结转移的患者dUTPase表达明显低于有淋巴结转移的大肠癌患者。结合前期发现dUTPase在不同转移潜能的大肠癌细胞株LoVo、SW480和LST-R1的表达依次降低，我们推测dUTPase在大肠癌的发生发展过程中起着一定作用，并且对大肠癌的治疗和预后是一个负向指标。本研究选取四种不同生物学特性的大肠癌细胞株LoVo、SW620、SW480和SW1116为研究对象，检测dUTPase在这四种细胞的表达，同时检测dUTPase在良、恶性大肠病变中的表达以证实dUTPase是大肠癌发生发展相关的蛋白质，随后进行表达调控，观测对大肠癌细胞生物学行为的影响，以进一步明确其在大肠癌的发生发展中的作用。由于进行性发展是恶性肿瘤的重要生物学行为之一，验证dUTPase是否参与大肠癌的演进过程，可为大肠癌的治疗等研究提供新思路。 材料和方法