【摘 要】
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K亚群禽白血病是一种禽类的肿瘤性疾病,由于目前无疫苗和药物能对其进行防控从而使全球家禽业受到了重创。海藻多糖是从海藻中提取的一种多组分混合物,具有抗病毒、抗炎、免疫调节等生物活性。通过研究海藻多糖对SPF鸡免疫功能及ALV-K复制的作用,为未来海藻多糖在畜牧业中实际应用奠定基础。本研究通过饲喂海藻多糖配合新城疫疫苗免疫SPF鸡,称重,测免疫器官指数;用ELISA方法检测血清中新城疫抗体效价及细胞因
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K亚群禽白血病是一种禽类的肿瘤性疾病,由于目前无疫苗和药物能对其进行防控从而使全球家禽业受到了重创。海藻多糖是从海藻中提取的一种多组分混合物,具有抗病毒、抗炎、免疫调节等生物活性。通过研究海藻多糖对SPF鸡免疫功能及ALV-K复制的作用,为未来海藻多糖在畜牧业中实际应用奠定基础。本研究通过饲喂海藻多糖配合新城疫疫苗免疫SPF鸡,称重,测免疫器官指数;用ELISA方法检测血清中新城疫抗体效价及细胞因子IL-2、IFN-γ含量;用流式细胞术分析鸡外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞的比值;并用石蜡制作组织切片HE染色的方法观察其对免疫器官是否有毒副作用;用RT-PCR法检测不同浓度海藻多糖在CEF细胞上对ALV-K复制的影响;通过测TCID50分析对ALV-K滴度的影响;比较分析病毒感染细胞炎性因子的表达量进一步从分子水平探究对ALV-K复制的作用。结果显示,各组鸡体重相似无显著差异（P>0.05）,说明海藻多糖在促进鸡生长方面作用不明显;试验组鸡免疫器官指数显著升高（P<0.05）,从器官组织水平上证明了海藻多糖具有免疫增强作用;ELISA结果显示试验组鸡血清中新城疫抗体效价,细胞因子IL-2、IFN-γ水平均有提高,同时流式细胞术测得的数据也显示试验组鸡外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比值均不同程度高于空白对照组,进一步又从细胞水平上证明了海藻多糖具有免疫增强作用;通过组织切片观察发现在饲粮中添加海藻多糖对鸡肝脏、脾脏、法氏囊无毒副作用,验证了它的安全性;通过海藻多糖在CEF细胞上与ALV-K作用发现,当海藻多糖终浓度达200μg/m L时病毒的相对表达量下降了69%,当浓度为25μg/m L、50μg/m L、100μg/m L时,病毒相对表达量分别下降了8%、26%、55%,说明对ALV-K的这种抑制作用呈现出剂量依赖性;TCID50结果显示200μg/m L海藻多糖能显著降低ALV-K的滴度（P<0.01）,进一步验证了海藻多糖能抑制ALV-K在CEF细胞上的增殖;RT-PCR结果显示病毒感染细胞促炎性因子ISG12-2、IL-1β、TNF-α表达量均显著下调,其中对IL-1β基因表达抑制作用最显著,下调0.926倍,ISG12-2、TNF-α基因表达量分别下调0.75、0.88倍。综上得出,在鸡饲粮中添加海藻多糖能明显促进鸡脾脏、法氏囊的发育,提高鸡血清中NDV-Ab效价、IL-2、IFN-γ水平及外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞比值,能促进鸡的细胞免疫和体液免疫。海藻多糖在CEF细胞上能抑制ALV-K复制,显著下调ISG12-2、IL-1β、TNF-α基因表达。
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