琼胶寡糖有多种生理活性,是一种极具开发潜力的功能性低聚糖。以酶解法制备的琼胶寡糖具有产物稳定、纯度高、无化学残留等特点,在开展生理活性研究中具有优势。溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）因反复发作,极难治愈,开发治疗UC的替代药物或功能性食品已迫在眉睫。本课题从菌株Shewanella sp.WPAGA9中挖掘了4个琼胶酶基因进行了克隆表达,选择其中酶活较好的Aga1540进行了酶学性质的研究,并应用于新琼寡糖的酶法制备。在动物水平研究了新琼寡糖的急性毒性,使用3.5%葡聚糖硫酸钠建立小鼠急性UC模型,研究新琼寡糖对UC在临床表现、病理改变和炎症因子方面的影响。在细胞水平上研究新琼寡糖的抗炎和免疫活性,并进行转录组测序,初步推测NAX参与的免疫通路,得出了以下实验结果:首先,Shewanella sp.WPAGA9琼胶酶基因表达时,IPTG终浓度为0.1 mmol/L,20℃,诱导16 h后得到的酶活最高。酶学性质分析表明,Aga1540最适温度为35℃,最适pH为7.0。Sr2+、Mn2+和Fe2+能促进酶活,其中Fe2+能显著提高酶活,而Zn2+和Cu2+抑制酶活,该酶的Km为15.73 mg/m L。将酶解48 h后的琼脂糖进行膜分离后得到新琼寡糖混合物,命名为NAX。经薄层层析和离子色谱法分析,NAX主要由新琼四糖和新琼六糖组成。其次,以小鼠灌胃NAX最大剂量37 g/kg,且未观察到明显毒性。剂量为30mg/kg和100 mg/kg时,均能降低模型组小鼠的疾病活动指数、脾脏重量减轻程度和血清中炎症因子TNF-α的含量,且剂量为100 mg/kg的效果更好,表现出剂量依赖性。结肠组织病理切片显示,与模型组相比,NAX给药后显著改善了结肠组织状态,肠粘膜上皮组织结构的完整性,以及上皮细胞的排列,减少粘膜层及粘膜下层浸润的炎性细胞。最后,NAX能显著抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞氮氧化物的分泌;同时增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,NAX具有抗炎和增强免疫的活性。通过转录组测序分析和实时荧光定量PCR验证,推测NAX的增强免疫活性可能是通过破骨细胞分化通路和白介素-17（IL-17）信号通路调节。以上结果表明,酶解法得到的NAX具有抗炎和增强免疫活性,并且具有抗溃疡性结肠炎的活性,此结论为机理研究及NAX治疗或预防UC打下了理论基础。