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目的
研究乌头汤对类风湿关节炎治疗作用,探讨其对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等表型的影响,对滑膜血管翳增生及组蛋白去乙酰化酶表达的影响。
方法
用乌头汤主要成分提取液处理人的成纤维样滑膜细胞系,通过MTT检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的增殖活性的影响,流式检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞凋亡的影响,划痕实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的侵袭性影响,管形成实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的诱导血管生成能力影响。然后通过PCR检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的组蛋白去乙酰化酶(HDAC)表达情况,并通过免疫荧光和Westernblot进一步验证。然后用牛II型胶原注射Wistar大鼠构建胶原诱导性关节炎模型,将造模成功的30只大鼠,分为模型组,低剂量乌头汤组(WTD-L),高剂量乌头汤组(WTD-H)三个组,每组10只。分别用不同剂量的乌头汤灌胃给药28天,正常对照组和CIA组用生理盐水灌胃。实验结束处死所有大鼠,收集膝关节滑膜。免疫组化检测滑膜血管生成情况,免疫荧光检测滑膜细胞的HDAC7的表达情况。
结果
乌头汤可以抑制成纤维样滑膜细胞的增殖、迁移、侵袭、以及诱导血管形成的能力,下调成纤维样滑膜细胞HDAC7的表达。在体实验进一步验证乌头汤可以缓解CIA大鼠关节肿胀疼痛,改善关节功能,抑制滑膜增生,抑制滑膜血管生成,下调HDAC7的表达。
结论
乌头汤可抑制成纤维样滑膜细胞增殖、迁移、侵袭、诱导血管翳形成,来改善关节肿胀,其影响滑膜血管翳增生可能与抑制成纤维样滑膜细胞中HDAC7的表达有关。
研究乌头汤对类风湿关节炎治疗作用,探讨其对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等表型的影响,对滑膜血管翳增生及组蛋白去乙酰化酶表达的影响。
方法
用乌头汤主要成分提取液处理人的成纤维样滑膜细胞系,通过MTT检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的增殖活性的影响,流式检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞凋亡的影响,划痕实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的侵袭性影响,管形成实验检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的诱导血管生成能力影响。然后通过PCR检测乌头汤对成纤维样滑膜细胞的组蛋白去乙酰化酶(HDAC)表达情况,并通过免疫荧光和Westernblot进一步验证。然后用牛II型胶原注射Wistar大鼠构建胶原诱导性关节炎模型,将造模成功的30只大鼠,分为模型组,低剂量乌头汤组(WTD-L),高剂量乌头汤组(WTD-H)三个组,每组10只。分别用不同剂量的乌头汤灌胃给药28天,正常对照组和CIA组用生理盐水灌胃。实验结束处死所有大鼠,收集膝关节滑膜。免疫组化检测滑膜血管生成情况,免疫荧光检测滑膜细胞的HDAC7的表达情况。
结果
乌头汤可以抑制成纤维样滑膜细胞的增殖、迁移、侵袭、以及诱导血管形成的能力,下调成纤维样滑膜细胞HDAC7的表达。在体实验进一步验证乌头汤可以缓解CIA大鼠关节肿胀疼痛,改善关节功能,抑制滑膜增生,抑制滑膜血管生成,下调HDAC7的表达。
结论
乌头汤可抑制成纤维样滑膜细胞增殖、迁移、侵袭、诱导血管翳形成,来改善关节肿胀,其影响滑膜血管翳增生可能与抑制成纤维样滑膜细胞中HDAC7的表达有关。