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目的:红雪茶中提取分离制备多糖类活性成分,并测定其含量,观察红雪茶提取物CLethariellacladonioidesextract,HXC)及红雪茶粗多糖CLethariellacladonioidespolysaccharide,LCP)对大鼠非酒精性脂肪肝CNAFLD)的降脂保肝作用并探讨其可能机制。
方法:第一部分:采用水提醇沉法、蛋臼酶除蛋白及透析法提取红雪茶多糖;采用苯盼,硫酸法和3,5-二硝基水杨酸CDNS)法测定红雪茶多糖含量。第二部分:将48只Wistar大鼠随机分为6组:正常组、模型组、红雪茶低剂量组、红雪茶中剂量组、红雪茶高剂量组、东宝甘泰组,除对照组喂基础饲料外,其余各组喂饲高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的HXC(含生药0.9、2.74.5g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2 g·kg-1·d-1)进行灌胃给药,连续6周。实验6周后,观察大鼠肝脏病理变化并检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、甘泊三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和肝组织TC、TG、丙二醒(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平。第三部分:将48只清洁级SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、模型组、红雪茶多糖低、中、高剂量组、东宝甘泰组每组各8只。除正常对照组喂基础饲料外,其余各组喂高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的红雪茶多糖(0.1 、 0.3、 0.5 g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2 g·kg-1·d-1 ),持续6周后检测血清与肝组织中的生化指标,并观察大鼠肝脏的病理切片,NAFLD活动度积分(NAS)评估肝组织的病理改变。
结果:第一部分:测得红雪茶粗多糖(LCP)中多糖含量为82.6%(相当于生药中多糖含量8.811%)。第二部分:与模型组相比,HXC可以明显降低肝湿质量与肝指数,显著降低血清中的ALT、AST、TC、TG、LDL-C及肝组织中的TC、TG,升高血清中的HDL-C,升高肝组织中的SOD及明显降低MDA(P<0.05或P<O.Ol),脂肪变性和水样变性程度明显减轻。
第三部分:LCP中剂量(0.3g.kg-1.d勺可以明显降低肝湿质量与肝指数(P<O.05),显著降低血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂CTG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织中的TC、TG及丙二醒(MDA)((P<O.Ol)且降低丙氨酸氨基转移酶(ALT),明显升高肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)CP<O.O日、谷脱甘肤(GSH)(P<O.Ol),脂肪变性和气球样变程度明显减轻。
结论:1采用水提醇沉法、蛋白酶除蛋白及透析法从红雪茶中提取红雪茶粗多糖(LCP),经苯盼.硫酸法和DNS法测定LCP中多糖含量,该测定方法快速、稳定、灵敏、重现性好。2.红雪茶提取物对高糖高脂饮食诱发的大鼠NAFLD具有明显的降脂保肝作用,其机制可能与提高机体抗氧化活力并抑制脂质过氧化反应有关。3.红雪茶粗多糖具有明显的降脂降酶保肝作用。红雪茶粗多糖在剂量为0.3g.kg-l.d-时能显著降低体内血脂和肝内脂肪,降低转氨酶水平,并且明显抑制脂质过氧化、提高机体抗氧化活力及清除体内自由基。
方法:第一部分:采用水提醇沉法、蛋臼酶除蛋白及透析法提取红雪茶多糖;采用苯盼,硫酸法和3,5-二硝基水杨酸CDNS)法测定红雪茶多糖含量。第二部分:将48只Wistar大鼠随机分为6组:正常组、模型组、红雪茶低剂量组、红雪茶中剂量组、红雪茶高剂量组、东宝甘泰组,除对照组喂基础饲料外,其余各组喂饲高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的HXC(含生药0.9、2.74.5g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2 g·kg-1·d-1)进行灌胃给药,连续6周。实验6周后,观察大鼠肝脏病理变化并检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、甘泊三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和肝组织TC、TG、丙二醒(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平。第三部分:将48只清洁级SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、模型组、红雪茶多糖低、中、高剂量组、东宝甘泰组每组各8只。除正常对照组喂基础饲料外,其余各组喂高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的红雪茶多糖(0.1 、 0.3、 0.5 g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2 g·kg-1·d-1 ),持续6周后检测血清与肝组织中的生化指标,并观察大鼠肝脏的病理切片,NAFLD活动度积分(NAS)评估肝组织的病理改变。
结果:第一部分:测得红雪茶粗多糖(LCP)中多糖含量为82.6%(相当于生药中多糖含量8.811%)。第二部分:与模型组相比,HXC可以明显降低肝湿质量与肝指数,显著降低血清中的ALT、AST、TC、TG、LDL-C及肝组织中的TC、TG,升高血清中的HDL-C,升高肝组织中的SOD及明显降低MDA(P<0.05或P<O.Ol),脂肪变性和水样变性程度明显减轻。
第三部分:LCP中剂量(0.3g.kg-1.d勺可以明显降低肝湿质量与肝指数(P<O.05),显著降低血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂CTG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织中的TC、TG及丙二醒(MDA)((P<O.Ol)且降低丙氨酸氨基转移酶(ALT),明显升高肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)CP<O.O日、谷脱甘肤(GSH)(P<O.Ol),脂肪变性和气球样变程度明显减轻。
结论:1采用水提醇沉法、蛋白酶除蛋白及透析法从红雪茶中提取红雪茶粗多糖(LCP),经苯盼.硫酸法和DNS法测定LCP中多糖含量,该测定方法快速、稳定、灵敏、重现性好。2.红雪茶提取物对高糖高脂饮食诱发的大鼠NAFLD具有明显的降脂保肝作用,其机制可能与提高机体抗氧化活力并抑制脂质过氧化反应有关。3.红雪茶粗多糖具有明显的降脂降酶保肝作用。红雪茶粗多糖在剂量为0.3g.kg-l.d-时能显著降低体内血脂和肝内脂肪,降低转氨酶水平,并且明显抑制脂质过氧化、提高机体抗氧化活力及清除体内自由基。