miRNA let-7a调控CCR7对前列腺癌细胞侵袭转移的机制研究

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目的:  探究miRNA let-7a通过调控CCR7对前列腺癌细胞侵袭转移的影响和机制  方法:  荧光素酶实验验证let-7a是否通过3TJTR调控CCR7;前列腺癌PC-3细胞分别转染let-7a模拟物及抑制剂后培养48小时,Western blot检测CCR7、ERK、P38、MMP-9及 EMT相关蛋白(E-cadherin蛋白、Snail蛋白和N-cadherin蛋白)的表达;PC-3细胞在转染Let-7a抑制剂后,再加入CCR7 siRNA培养48小时Western blot检测ERK、P38蛋白的表达;P38、Erk抑制剂(SB233850、PD98059)分别加入转染Let-7a模拟物的PC-3细胞培养48小时,Western blot检测E-cadherin蛋白、Snail蛋白和N-cadherin蛋白的表达;Transwell检测转染后的前列腺癌PC-3细胞侵袭和转移能力。  结果:  let-7a通过3TJTR调控CCR7;前列腺癌PC-3细胞转染let-7a模拟物后,Western blot结果表明CCR7、P-ERK、P-P38、MMP-9、Snail及N-cadherin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平增加;PC-3细胞转染Let-7a抑制剂后再加入CCR7 siRNA后,Western blot结果表明P-ERK、P-P38表达降低,PC-3细胞转染Let-7a模拟物后加入P38、Erk抑制剂后,Western blot结果表明Snail蛋白和N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达增加,Transwell实验表明前列腺癌PC-3细胞转染let-7a模拟物后,其侵袭和转移能力降低。  结论:  MiRNAlet-7a可以下调CCR7的表达,经MAPK通路来抑制前列腺癌的侵袭转移及上皮间充质转化。我们的研究结果表明let-7a作为前列腺癌和CCR7抗肿瘤和抗转移治疗剂的治疗潜力可被视为前列腺癌治疗的治疗靶点。
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