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目的 通过检测颊粘膜细胞白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达,外周静脉血IL-1β+3953基因多态性及血清中免疫球蛋白(包括免疫球蛋白G,免疫球蛋白A,免疫球蛋白M)含量在慢性牙周炎患者和牙周健康者之间的差异,探讨牙周炎发生发展过程中机体的免疫功能以及遗传因素即基因型对机体局部细胞免疫反应的影响。 材料与方法 1.研究对象的选择:病例组选择诊断为慢性牙周炎患者36例,其中重度慢性牙周炎25例,轻中度慢性牙周炎11例;对照组选择临床牙周健康,年龄,性别与病例组具可比性者36例。所有研究对象均是汉族,未接受过牙周治疗,无全身系统性疾病,近3个月未服用抗生素,无吸烟史,知情同意。 2.检查临床牙周状况:记录受试者全口牙齿菌斑指数(Plaque Index,PLI),探诊出血指数(Bleeding on Probing,BOP),牙周探诊深度(Probing Depth,PD)及临床附着丧失(Clinical Attachment Loss,CAL)。 3.样本采集:用无菌细胞刷刷取双侧颊粘膜细胞,悬浮于1.5ml PBS缓冲液中,同时于前臂采集3ml静脉血,1ml注入抗凝管中,另外2ml离心后吸取血清存放于无菌管内,全部样本均-70℃冷冻保存。 4.IL-1β的免疫组化检测:颊粘膜细胞样本离心,弃上清,加入10%甲醛固定15min,吸管吹打均匀后滴片。采用免疫组化(SABC法)对IL-1β进行染色,在光学显微镜下选取细胞分散均匀视野,于×40倍镜下随机计数100个细胞,测定颊粘膜细胞IL-1β阳性表达情况。