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目的探讨miR-125a靶向调节转录因子STAT3对宫颈癌细胞分泌IL-10功能的影响,验证miR-125a直接靶向调节STAT3基因的表达,分析宫颈癌患者组织中miR-125a和STAT3 m RNA表达与临床病理特征的关系。方法收集自2015年9月至2017年3月于河北省唐山市工人医院妇科门诊和住院部接受诊治的汉族女性的不同病变程度宫颈组织作为实验标本,共166例。严格按照标本采集的纳入标准和排除标准。所有纳入实验的标本均由课题室实验人员与医院病理科专业医师共同确认病理分级和类型,包括:正常对照组(Control)40例、宫颈上皮内瘤变组(CIN)70例(其中CINⅠ21例,CINⅡ-Ⅲ49例)和宫颈鳞癌组(CSCC)56例。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测不同病理宫颈组织中miR-125a,STAT3和IL-10 m RNA的表达水平并分析每两者之间的相关性,分析miR-125a、STAT3 m RNA表达水平与宫颈鳞癌临床特征的关系。在人宫颈癌Siha细胞中,分别转染miR-125a mimics或miR-NC,采用qRT-PCR方法检测细胞内STAT3和IL-10 m RNA水平变化,采用Western blot方法检测细胞内STAT3蛋白的水平变化,采用ELISA方法检测经转染后Siha细胞培养液中IL-10的表达水平。采用生物信息学预测以及双荧光素酶报告基因实验技术验证miR-125a与STAT3 m RNA的3,UTR区域存在相互作用;并分析miR-125a过表达对STAT3m RNA及蛋白表达水平的影响。结果1采用qRT-PCR实验检测不同病理人宫颈组织中miR-125a,STAT3和IL-10的m RNA表达水平,结果显示,与正常对照组相比,CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组和SCC组宫颈组织中miR-125a的表达水平逐渐降低,且病理分级越高,miR-125a的表达水平越低(P<0.05);STAT3和IL-10的m RNA表达水平逐渐升高,且随病理程度的加重而升高(P<0.05);与CINⅡ-Ⅲ组相比,CSCC组中miR-125a的表达同样明显降低,并且STAT3和IL-10的m RNA表达水平增高,差异有统计学意义(P<0.05)。2采用Pearson法分析不同病理人宫颈组织中miR-125a、STAT3 m RNA与IL-10 m RNA三者之间表达的相关性,在正常对照组和CINⅠ组中miR-125a与STAT3 m RNA以及STAT3与IL-10的m RNA表达均无明显相关性(P>0.05);在CINⅡ-Ⅲ组中STAT3和miR-125a的表达水平呈负相关(r=-0.3042,P=0.0336);STAT3和IL-10的m RNA表达水平呈正相关(r=0.3431,P=0.0158);CSCC组中,STAT3和miR-125a的表达水平呈负相关(r=-0.3295,P=0.0057);IL-10和STAT3的m RNA表达水平呈正相关(r=0.4578,P=0.0004)。3在Siha细胞中转染miR-125a mimics后,与转染miR-NC细胞相比,过表达miR-125a可下调STAT3 m RNA和蛋白的表达水平。4 ELISA结果显示,培养宫颈癌细胞(Siha)上清液中,过表达miR-125a会明显降低IL-10的分泌水平。生物信息学预测和双荧光素酶报告基因分析结果证实,miR-125a与STAT3之间存在靶向负调控关系。5宫颈鳞癌临床参数相关分析结果证实:宫颈鳞癌组织中miR-125a的表达水平与宫颈癌的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(均P<0.05);且存在淋巴结转移的宫颈鳞癌患者中,miR-125a表达水平明显降低(P<0.05);STAT3的m RNA表达与肿瘤的分化程度和淋巴结转移有关(均P<0.05),与年龄、肿瘤大小、FIGO分期无关(均P>0.05)。结论1在宫颈癌组织中,miR-125a表达下调,STAT3及IL-10表达上调,且miR-125a表达与宫颈癌的临床分期、淋巴结转移及肿瘤的分化程度有关。2miR-125a可直接靶向负调控STAT3;3在宫颈癌细胞中,过表达miR-125a会抑制STAT3的表达水平,进一步促进IL-10的表达,造成免疫平衡失调,使HR-HPV持续感染,促进宫颈癌的发生与发展。