白色念珠菌细胞壁不溶性β-葡聚糖(β-glucan)抗肿瘤细胞的实验研究

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【目的】白色念珠菌细胞壁不溶性β-葡聚糖(candida albicans insolubleβ-glucan,CAIBG)是一类生物反应调节剂(biological response modifiers,BRM),具有抗肿瘤、升白细胞、抗病毒等广泛的生物学活性。本研究前期实验已经成功地从白色念珠菌细胞壁中分离出不溶性β-葡聚糖,并通过动物实验证实了CAIBG能对抗环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)引起的免疫抑制作用,具有升高小鼠外周血中白细胞数的功能,而且能诱导小鼠外周血中TNF-α、IL-1β的升高以及小鼠脾脏中TNF-αmRNA的表达水平升高,并在基因、分子水平研究了CAIBG的升白细胞作用机理。本实验从白色念珠菌细胞壁提取不溶性β-葡聚糖,观察CAIBG对体外培养的B16恶性黑色素瘤细胞、SGC-7901胃腺癌细胞、SMMC-7721肝癌细胞和XW-05肺腺癌细胞的生长抑制作用并初步探讨其机制。【方法】首先从白色念珠菌细胞壁提取不溶性β-葡聚糖,体外培养B16恶性黑色素瘤细胞、SGC-7901胃腺癌细胞、SMMC-7721肝癌细胞和XW-05肺腺癌细胞,当细胞处于对数生长期时加入不同浓度的CAIBG,用光镜观察细胞的形态以及生长情况。用改良四甲基偶氮哗盐(简称改良MTT)法测定不同时间和浓度的CAIBG对以上细胞的生长抑制作用;在以上几株肿瘤细胞中选择对CAIBG最敏感的一株,选其在临床上的治疗药物顺铂,比较其与CAIBG对该肿瘤细胞生长抑制作用,再结合流式细胞仪检测加入CAIBG后肿瘤细胞的凋亡率和细胞周期分布时相。【结果】CAIBG对B16恶性黑色素瘤细胞、SGC-7901胃腺癌细胞和XW-05肺腺癌细胞有不同程度的体外生长抑制作用,生长抑制率最高分别为42.8%、59.88%、61.97%,IC50分别约为1506.5μg/ml、429.8μg/ml、293.4μg/ml;在形态上具有凋亡细胞的形态特征,不同浓度的CAIBG作用于同一肿瘤细胞的抑制作用具有差异性(P<0.05),不同肿瘤细胞对同一浓度CAIBG的敏感性差异无显著性(P>0.05),其中XW-05肺腺癌细胞对CAIBG的敏感性最高,CAIBG和顺铂对XWLC-05肺腺癌的体外抑制作用比较,差异有显著性(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示CAIBG对XW-05肺腺癌细胞的细胞周期没有影响。对SMMC-7721肝癌细胞的体外生长不具有直接抑制作用。【结论】不同类型肿瘤细胞对同一浓度CAIBG反应性不同,显示治疗个体化的必要性;同一类型肿瘤细胞对不同浓度药物反应性不一,显示选择最佳药物浓度的重要性。CAIBG具有体外直接抑制肿瘤细胞生长的作用,是具有良好的应用开发前景抗肿瘤药物。
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