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目的: 1.建立不同基因型沙眼衣原体(Ct)小鼠生殖道感染模型，观察不同基因型别引起小鼠生殖道局部黏膜组织变化的差异。 2.分析衣原体热休克蛋白60(cHSP60)和衣原体蛋白酶/蛋白酶样活性因子(CPAF)表达的差异及其与局部黏膜组织变化的相关性，探讨不同基因型别Ct引起生殖道黏膜损伤的可能机制。 3.研究不同基因型Ct女性生殖道感染与临床表现的相关性;比较不同基因型Ct感染宫颈分泌物中cHSP60和CPAF表达的差异。 方法: 1.小鼠Ct感染模型的建立 ①取临床泌尿生殖道标本培养鉴定并测序分型，分离E、F、J、K、H型Ct株，扩大培养后计数包涵体并调整包涵体浓度，制备Ct悬液。②20只6～7周龄雌性Balb/c小鼠分为空白对照组、实验对照组、无孕酮对照组及实验组（每组5只），实验对照组及实验组于接种前10d、3d皮下注射醋酸甲羟孕酮2.5mg，实验组及无孕酮对照组分别阴道接种30μl F型Ct悬液(2.5×107 IFU/ml)，实验对照组阴道接种30μl衣原体保存培养基(SPG)，空白对照组不做任何处理。在接种后4d、7d分别取阴道-宫颈口分泌物，用细胞培养、直接免疫荧光和实时荧光定量PCR证实Ct感染的存在。于接种后7d取宫颈组织，电镜观察病变组织中Ct的存在。 2.小鼠生殖道不同基因型Ct感染的致病性差异 105只6～7周龄雌性Balb/c小鼠分为空白对照组、实验对照组及五组实验组（每组15只），孕酮处理实验对照组及实验组后，各取30μl E、F、J、K、H型Ct悬液(2.5×107 IFU/ml)用上述方法分别接种于五组实验组小鼠阴道内，实验对照组阴道接种30μl SPG，空白对照组不做任何处理。在接种后4d、7d、10d、14d、17d、21 d分别取阴道-宫颈口分泌物，用细胞培养、直接免疫荧光和实时荧光定量PCR监测Ct阳性持续时间。接种后7d、35 d分别取宫颈子宫输卵管组织，切片后HE染色观察炎症严重程度。ELISA分别检测7d阴道-宫颈分泌物和35 d子宫输卵管组织匀浆中cHSP60和CPAF表达。 3.女性不同基因型Ct感染与临床表现相关性的初步研究 收集女性Ct感染标本，巢式PCR扩增外膜蛋白Omp1基因的VS1-VS2序列，扩增产物基因测序分型。ELISA检测不同基因型沙眼衣原体感染宫颈分泌物中cHSP60和CPAF表达，分析不同基因型沙眼衣原体感染与临床表现的相关性。 结果: 1.小鼠Ct感染模型的建立 ①成功培养并测序鉴定出E、F、J、K、H五个基因型别临床株，通过传代培养收集到高浓度的Ct悬液(2.5×107IFU/ml)。②成功建立Ct临床株小鼠生殖道感染模型，接种后第4d、7d用三种实验方法检测小鼠阴道-宫颈分泌物均证实感染率为100％，接种后7d电镜观察可见小鼠宫颈黏膜上皮内Ct的存在。 2.小鼠生殖道不同基因型Ct感染的致病性差异 ①小鼠阴道-宫颈口分泌物中Ct持续阳性时间五组实验组的中位天数均为7天，差异无统计学意义(P＞0.05)。②宫颈黏膜炎症反应程度（接种Ct后7d）E组比J、K、H组重(P＜0.05);接种Ct后35 d，J、K、H组小鼠上生殖道出现严重的组织病理学改变，表现为子宫肿胀、积脓积液，输卵管扩张积水、纤维化、管腔变窄等，E、F组小鼠未见明显上述改变。③小鼠接种Ct后7d，E组分泌物中cHSP60表达显著高于其余各实验组及对照组(P＜0.05)，但F、J、K、H组间差异无统计学意义（P＞0.05）;E组CPAF表达高于H组和J组(P＜0.05);但F、J、K组间差异无统计学意义(P＞0.05)。小鼠接种Ct后35d，E组cHSP60表达低于其余各实验组(P＜0.05)，H组cHSP60表达高于E组、F组、J组(P＜0.05);H组CPAF表达高于E组、F组、J组(P＜0.05)，但E、F、J组间差异无统计学意义(P＞0.05)。④实验组cHSP60和CPAF水平在接种Ct后7d、35 d均呈明显正相关（r值分别为0.647和0.661，P＜0.05）。cHSP60、CPAF水平分别与局部黏膜炎症反应程度呈明显正相关(P＜0.05)。 3.女性不同基因型Ct感染与临床表现相关性的初步研究 ①60例女性生殖道Ct感染阳性标本中E型14例(23.33％)，J型14例(23.33％)，F型13例(21.67％)，G型9例(15％)，D型5例(8.33％)，不确定型5例(8.33％)。②女性生殖道J型Ct感染患者宫颈分泌物中cHSP60及CPAF表达均显著高于E型、F型、G型及D型(P＜0.05);cHSP60水平E型高于G型，差异有统计学意义（P＜0.05）;CPAF表达E型明显高于G型和D型，差异有统计学意义(P＜0.05)。③女性泌尿生殖道不同基因型Ct感染者间的临床表现差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论: 1.Ct基因型别间致病性存在一定差异，且不同感染时期表现不同。E、F型Ct主要引起宫颈黏液脓性分泌物，上行感染不明显;J、K、H型Ct感染早期症状不明显，但容易出现上行感染并导致严重的子宫输卵管病变。 2.感染早期，E型Ct感染小鼠后产生大量cHSP60和CPAF，F组次之;感染后期，J、K、H型Ct感染小鼠后产生大量cHSP60和CPAF，且与局部黏膜组织反应程度呈正相关。推测cHSP60和CPAF可能参与了泌尿生殖道Ct感染引起的免疫损伤。 3.女性生殖道Ct感染患者中不同基因型Ct感染与临床表现之间缺乏关联性，需扩大样本量进一步研究。