副流感病毒5型（Parainfluenza virus 5,PIV5）是引起哺乳动物呼吸道疾病的主要病因之一,且呈世界性的分布,在我国亦出现了流行的趋势。PIV5基因组大小为15246 nt。从3’端到5’端一共编码生成7种常见结构蛋白:NP、V/P、M、F、SH、HN、L。PIV5的宿主较多,可以感染包括犬、虎、豚鼠、貉、貂等哺乳动物。此外PIV5常与其他病原一起混合感染,单一感染的情况不多见。但目前动物园中少有关于PIV5感染的相关报道,早些年在虎的血清中检测到PIV5的抗体;而近几年来,本实验室先后从小熊猫肺组织以及东北虎血清中检测并分离到PIV5;但还未有穿山甲感染PIV5及其他病毒的相关报道。本试验中对孟加拉虎源和穿山甲源PIV5进行全基因序列的测定,并对分离株的基因全序列进行同源性分析及遗传进化分析,探究该病毒的演变规律,从中了解所分离株的变异情况,丰富了我国PIV5基因组数据信息,同时为PIV5的预防和治疗以及更进一步深入研究奠定了基础。本研究于2017年10月～2018年2月采集广东省某动物园疑似PIV5感染死亡的孟加拉虎肺部组织1份,及广东省某野生动物救助中心疑似PIV5感染死亡穿山甲的肺脏、肝脏及肾脏等组织病料11份。采用Vero细胞和MDCK细胞进行病毒分离培养,并通过红细胞吸附试验、RT-PCR检测及透射电镜观察进一步鉴定所分离到的病毒为PIV5,并命名为HMZ（孟加拉虎源）、CAN（穿山甲源）。通过分段测序的方法对所分离病毒的全基因组进行测序及序列分析,并上传至NCBI,序列号分别为:MH370862（HMZ）、MH362816（CAN）。PIV5分离株全基因序列同源性比较结果表明:HMZ与21株参考毒株的全基因序列相似性为97.2%～99.8%。其中与1168-1、Mammalian rubulavirus 5及ZJQ-221亲缘性最高,为99.8%;与D277（KC237065）的亲缘性最低,为97.2%。CAN与21参考毒株的全基因序列相似性为97.2%～99.8%。其中与1168-1、Mammalian rubulavirus 5及ZJQ-221亲缘性最高,为99.8%;与D277和08-1990（KC237063）的亲缘性最低,为97.2%。两株病毒与ZJQ-221及Mammalian rubulavirus 5属于同一分支。而它们组成的分支与1168-1接近,与D277和08-1990亲缘关系最远。为了探究应激对昆明小鼠感染PIV5 CAN株的影响,本试验随机将24只昆明小鼠分成4组:空白对照组、应激对照组、非应激感染组和应激感染组,并通过滴鼻接种的方式接种100μL(106.36TCID50)PIV5-CAN,对照组则用同等剂量的DMEM细胞培养液代替。结果表明,感染组小鼠的精神状态相较于对照组小鼠均显较差,此外体重也成不同程度的下降。实验8天内空白对照组小鼠的体重平均增长了8.39%;应激对照组小鼠增长了7.57%;非应激感染组增长了5.47%;而应激感染组仅增长了4.05%。利用统计软件SPSS 17.0的t检测方法检验各实验组与对照组之间的差异,结果表示空白对照组与应激感染组有差异显著（P<0.05）。通过对病理切片的观察发现实验组小鼠肺泡壁增厚,肺泡上皮细胞增生,并伴有炎性细胞浸润;脾脏的脾小结中有大量的淋巴细胞坏死、减少;有大量的巨噬细胞发生吞噬,嗜酸性增强,疑似巨噬细胞坏死;其红髓和白髓中均多见中性粒细胞浸润。本研究证实了PIV5 CAN株对昆明小鼠具有致病性,且在应激条件下致病性更为严重。