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作为一种普遍存在的翻译后修饰,糖基化对蛋白质的结构和功能有着重要影响。研究认为人类许多疾病的发生和发展都与蛋白上N-糖链的结构和表达量的改变有关,通过N-糖链定量分析,可以精确地寻找疾病中糖链发生的异常变化,对疾病的诊断和治疗起着不可估量的作用。目前基于质谱检测的化学标记是进行N-糖链定量的有效方法,但这些技术都需要在实验过程中进行额外的化学反应,对标记效果和样品的纯化都有不利影响。Endo-M酶转糖基反应可以很好地解决上述问题。该酶可以在切N-糖链的同时,将糖链转移到糖基受体。在本研究中,合成了几种可提高质谱检测灵敏度和分辨率的轻、重稳定同位素标记的受体,为建立基于糖链转移酶的N-糖链定量方法提供必要的受体。在第一章中,合成了两对稳定同位素标记Endo-M酶糖基受体和两个氘代糖基受体,考查了每一步化合物的最佳反应条件,优化每一步化合物了纯化方法,并对每一步化合物进行了核磁、质谱、紫外、液相、熔点等表征。为N-糖链的糖类物质进行相对定量分析,提供衍生化试剂的需求。在第二章中,以(d0/d8)-PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc为稳定同位素标记受体,利用Endo-M-N175Q的糖链转移反应,进行了唾液酸糖肽SGP的糖链转移。通过UPLC-ESI-TOF-MS分析,检测到分别被d0-/d8-受体标记的转糖基产物,且其相对丰度比值接近1：1。此结果为建立一种具有操作简便、灵敏度高、准确度高的N-糖链相对定量分析方法打下基础。在第三章中,合成的新受体可以与羧酸结合,并且具有紫外吸收,因此可以通过HPLC检测熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸等胆酸类物质的衍生化产物,新受体水溶性好,质谱响应较高,可以通过MALDI-TOF-MS检测对甲基苯甲酸等羧酸类物质的衍生化产物。建立一种用量少、快捷、简便的RP-HPLC分析方法。在第四章中,对糖链的分类及其生物功能做了简单的介绍,归纳了目前现代生物质谱技术对糖链的定量分析方法。