【摘 要】
：
目的:非小细胞肺癌（NSCLC）是我国发病和死亡人数最多的癌症,越来越多患者对近年崛起的免疫治疗逐渐产生耐药性,所以探索免疫治疗机制成为迫切的研究热点。CC类趋化因子CCL2在前列腺癌、乳腺癌、胃癌中,可通过抑制自噬并导致肿瘤细胞进一步侵袭。CCL2作为一种主要起促肿瘤作用的趋化因子,在NSCLC中CCL2高表达提示预后不良,其受体CCR2作为自噬通路相关基因与肺腺癌患者预后有关。方法:本实验以人
论文部分内容阅读
目的:非小细胞肺癌（NSCLC）是我国发病和死亡人数最多的癌症,越来越多患者对近年崛起的免疫治疗逐渐产生耐药性,所以探索免疫治疗机制成为迫切的研究热点。CC类趋化因子CCL2在前列腺癌、乳腺癌、胃癌中,可通过抑制自噬并导致肿瘤细胞进一步侵袭。CCL2作为一种主要起促肿瘤作用的趋化因子,在NSCLC中CCL2高表达提示预后不良,其受体CCR2作为自噬通路相关基因与肺腺癌患者预后有关。方法:本实验以人非小细胞肺癌细胞A549为实验对象,将CCL2过表达质粒瞬时转染A549细胞作为实验组,将转染空白质粒的A549细胞作为实验对照组,将仅加入转染试剂的A549细胞作为空白对照组。使用转染技术成功构建CCL2过表达A549细胞模型后,实验组与对照组进行RT-PCR实验、q RT-PCR实验及Western Blot实验,检测A549自噬水平,明确A549是否通过m TOR通路调控自噬水平。使用Adobe Photoshop 2021、Microsoft Power Point、Image J软件处理结果,并用Graph Pad Prism8.0.1软件处理数据并进行统计学分析。结果:质粒转染A549后,倒置显微镜观察结果显示:CCL2转染组与空白质粒转染组相比,细胞数量没有差异;荧光显微镜观察结果显示:随着培养时间增加,在CCL2转染组和空白质粒转染组,荧光信号逐渐增加,而空白对照组没有发现荧光信号,表明转染实验成功。利用RT-PCR和q RT-PCR检测质粒转染后CCL2的m RNA表达水平,结果显示:CCL2转染组细胞CCL2 m RNA表达水平显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;Western blot结果显示:CCL2的蛋白表达水平显著升高,定量分析结果显示差异具有统计学意义（P＜0.05）;这些结果表明在A549细胞中成功过表达CCL2。利用RT-PCR和q RT-PCR检测CCL2过表达对自噬标志物m RNA表达水平的影响,结果显示过表达CCL2对LC3B、p62、Beclin1 m RNA表达水平无影响（P＞0.05）;然而Western blot结果显示:过表达CCL2小幅下调LC3B II/I比值,小幅上调p62蛋白表达水平,且差异有统计学意义（P＜0.05）。这些结果表明过表达CCL2抑制A549细胞自噬。进一步利用Western blot检测过表达CCL2对自噬信号传导的影响,结果显示:过表达CCL2上调m TOR相对磷酸化水平,提示:CCL2通过活化m TOR抑制肺癌细胞A549自噬。结论:在非小细胞肺癌A549细胞中,过表达CCL2可能通过活化m TOR信号通路抑制自噬。
其他文献
目的:从肌张力、肢体肌力以及日常生活能力三个方面,分析平衡舒筋手法治疗脑出血后痉挛性瘫痪的疗效,以便其更好地运用于临床。方法:通过前瞻性队列研究观察2020年12月至2022年2月来自湖南省中医药研究院附属医院、三真康复医院、红枫康复医院的脑出血后痉挛性瘫痪的住院患者共100例。根据患者治疗意愿分为治疗组（基础治疗+平衡舒筋手法）与对照组（基础治疗+Bobath技术）,共观察2周。两组统一采用改良
目的:本研究通过探讨三参首乌汤对人脐静脉内皮细胞（HUVEC细胞）的增殖及细胞凋亡的影响,为三参首乌汤治疗冠心病提供理论基础。方法:1.体外培养HUVEC细胞,当细胞状态良好并处于指数生长期时,将细胞以5×10~4/m L的密度种植到96孔板中,将其分为对照组、不同浓度梯度的三参首乌汤干预组,药物作用细胞24 h后,采用CCK8法检测不同浓度梯度的三参首乌汤对HUVEC细胞活力的影响;根据CCK8
目的:本实验通过大兔腹股沟处脂肪提取兔脂肪干细胞（Rabbit adipose stem cells,RADSCs）,并进行体外培养,培养至数代后,检测其增殖、向成骨分化的能力,证明其具有脂肪干细胞的特性。在前期提取细胞实验的基础上,通过分离、培养兔脂肪干细胞,制备止痛健骨方含药血清,并将其分为对照组、实验组诱导其向成骨分化,观察止痛健骨方对骨形成蛋白-7（Bone morphogenetic p
目的:验证lnc RNA PANDAR对人结肠癌细胞的增殖能力、迁移能力的影响;初步探讨健脾消癌方是否通过调控lnc RNA PANDAR影响人结肠癌细胞增殖和迁移能力。方法:RT-PCR检验人结肠癌细胞HCT116、SW620、SW480与人正常结肠上皮细胞NCM460中lnc RNA PANDAR的表达水平。无药血清、健脾消癌方含药血清进行干预,将HCT116细胞分为10%无药血清组、15%无
基于对“少阳主枢”“三焦气化”理论的溯源与思考，探讨“疏利少阳三焦”学术思想内涵，总结“疏利少阳法”的确立及临床实践进展，并结合“三焦辨证”理论拓展“少阳三焦”的含义，临证以“疏利三焦法”“疏利三焦针法”辨治肾脏病，关注疾病的传变规律，以期为中医药在肾脏病辨证体系中的传承与发展寻找新的思路与方法。
目的:肝癌的发生转移与肿瘤微环境密切相关。其中,肿瘤相关巨噬细胞是影响肿瘤发生与发展的重要因素。本研究通过生物信息学数据分析出AMPK能量代谢通路,以“固本消积方”进行干预研究,揭示该方对AMPK能量代谢通路的作用,探讨该方对肿瘤相关巨噬细胞与肝癌细胞能量代谢竞争的作用机制。方法:首先通过生物信息学数据分析出AMPK能量代谢通路,然后我们培养人肝癌Hep G2细胞及人白血病单核细胞株THP-1细胞
目的:本实验通过检测试验组和对照组患者血清的Sfrp2浓度,探讨血清Sfrp2浓度与CHF发生的相关性。方法:选取2021年4月-2021年12月就诊于本院心血管内科就诊的CHF患者为试验组,同期有心脏基础疾病但尚未发生CHF的患者为对照组。并根据美国心脏病协会心功能分级将试验组分为Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级3个亚组;根据左室射血分数对CHF进行分类:射血分数降低的心力衰竭（HFr EF）、射血分数轻度降低
目的:臀肌挛缩症是一种以臀肌、髂胫束及相关筋膜挛缩,导致髋关节功能受限,表现为特有的步态和体征一类临床综合。严重影响了青少年的身心健康。本文旨在通过比较正常人群与臀肌挛缩症患者骨盆X线各个参数的差异性,归纳其影像学征象,进而分析特征性参数与不同臀肌挛缩部位的相关性。旨在为临床诊断与治疗臀肌挛缩症提供影像学依据。方法:本文为回顾性病例对照研究,收集2012年8月至2021年4月在南华大学附属长沙中心
目的:本项目基于真实世界研究,初步评价通幽消积方加减对食管癌的临床疗效及安全性,为该方治疗食管癌提供科学依据。方法:收集近10年（2012-2021年）湖南省中医肿瘤诊疗中心住院部的食管癌患者,按照纳入标准及排除标准进行筛选,患者共64例。观察患者入组前及服用通幽消积方加减治疗8周后的肿瘤标志物、吞咽困难程度、相关证候、KPS评分、不良反应,并从性别、年龄、吸烟、饮酒、发病部位、肿瘤分期、分化程度
王育良系全国第六批名老中医药专家学术经验继承工作指导老师，主要从事中西医结合治疗眼病和中医眼科现代化研究。文章主要从其学术思想及学术创新2个方面进行探讨。王育良临证时眼体合参，综合辨证；辨证施治，强调治肝；认为眼病多瘀，擅长活血用药；重视脾胃，补肾治本。王育良临床思路广阔，治病多法，以清热养阴散瘀为指导思想研制了润目灵治疗干眼，并首创了眼与光照节律关系的思想，运用其指导临床用药。