EV71诱导外周血单个核细胞合成释放IP-10信号分子机制的研究

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangzhenx06
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
手足口病是由肠道病毒感染引起的急性传染病,研究表明重症病例,大部分为肠道病毒71型(enterovirus71, EV71)感染所致,EV71感染可以引起手足口病、疱疹性咽峡炎、无菌性脑膜炎、脑炎、脊髓灰质炎样的麻痹性疾病及神经源性肺水肿等多种与神经系统相关的疾病,而且可以同时侵犯免疫器官和免疫细胞,从而造成对免疫系统的损害,引起全身多器官的免疫炎性反应。目前,针对这种病毒诱导的免疫损伤尚没有特效的药物治疗,临床上采用糖皮质激素治疗可在一定程度上减轻炎症、缓解症状,但是激素治疗的同时也抑制了机体的免疫反应,不仅影响了病毒的清除,还可能促进了条件致病菌的继发感染。研究发现:EV71病毒感染后可诱导机体产生以γ-IFN可诱导的趋化因子IP-10(interferon-gamma inducible protein10)为代表的炎症瀑布效应,进而刺激多种炎症细胞活化,在EV71介导的弥漫性脑损伤与免疫器官损伤而造成免疫功能抑制中起着重要作用。本研究旨在发现EV71介导的急性免疫损伤的信号转导分子机制,本课题包括两部分。第一部分EV71病毒感染PBMC模型的建立及培养上清中IP-10的检测目的成功建立EV71病毒直接感染人外周血单个核细胞PBMC (human peripheral blood mononuclear cells)的体外模型,为进一步从外周血单个核细胞分子生物学的角度探讨EV71感染后免疫损伤阶段的发病机理奠定基础。并研究EV71标准毒株作用于外周血单个核细胞后对趋化因子IP-10生成的影响。方法以EV71病毒感染外周血单个核细胞,观察感染后的细胞病变,采用逆转录聚合酶链方法(RT-PCR)扩增出EV71的特异性条带。用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)的表达。结果外周血单个核细胞感染EV71病毒后,逐步出现了细胞病变,RT-PCR可以扩增出EV71的特异性条带。基础状态下,不能检出IP-10的存在;在100倍半数感染量(100TCID50) EV71标准毒株及重组人[FN-γ (500U/ml)刺激下,人外周血单个核细胞PBMC均可检测到高水平的IP-10表达(分别为112.89±12.10;80.06±6.23,)。结论EV71病毒能够感染PBMC,并引起明显的形态学改变。EV71病毒感染可以使趋化因子IP-10水平明显增高,能诱导PBMC合成释放IP-10。第二部分研究EV71诱导PBMC合成释放IP-10(interferon-gamma inducible protein10)的信号分子机制目的探讨EV71感染对PBMC的作用及主要信号转导通路的激活,寻找介导免疫损伤的信号分子节点。方法RT-PCR法检测JAK-STAT信号通路介导的关键转录因子-干扰素调节因子-1(IRF-1)、IP-10基因的表达以及WESTERN-BLOT法检测磷酸化信号传导和转录激活子(P-STAT1)的表达。结果RT-PCR结果证实:EV71病毒诱导了PBMC的IRF-1、IP-10基因的表达;WESTERN-BLOT方法结果表明:EV71病毒作用于PBMC诱导了STAT1的磷酸化。结论EV71病毒感染PBMC可以使趋化因子IP-10水平明显增高,IP-10在EV71感染后导致的急性免疫损伤中起重要作用。EV71通过激活JAK-STAT信号转导通路诱导IP-10在PBMC的生成,使被EV71感染的PBMC中大量生成和释放IP-10。STAT1在EV71感染PBMC激活JAK-STAT信号通路中起着极其重要的作用。EV71通过激活的STAT1启动IRF-1转录从而启动IP-10转录,EV71诱导的JAK-STAT信号通路的激活是EV71感染引起相关免疫损伤的发病机制之一。
其他文献
<正>近期,美国总统办公室发布了《为人工智能的未来做好准备》和《美国国家人工智能研究与发展策略规划》两份报告,英国政府也发布了《人工智能:未来决策制定的机遇与影响》
为了解决北方农村的清洁供暖问题,自行设计了一种适于北方广大农村住宅制冷和制热的直接蒸发式地源热泵分体式空调机组,将各部分集成,并通过可变温度热源对机组进行了测试,测
文化产业是指生产文化产品或提供文化服务以满足社会精神文化需要的行业部门的总称。文化产业的发展水平已成为衡量一个国家和地区现代文明程度的重要尺度,而文化产业融资规模
今年上半年,江苏省大丰县委、县政府针对旧城改造拆迁难的问题,在县城大刘路工程拆迁中,推出“谁家孩子谁家抱”的拆迁承包责任制,收到了较好的效果。大刘路拆迁工作自4月23
人民币国际化是一个长期的过程,将对我国的经济金融产生重大影响,它包含了可自由兑换、广泛使用以及齐全的功能三重含义。同时,人民币的国际化也对我国金融体制的改革提出了
农业、农村、农民是乡村振兴的重要载体和支柱,农村的各项支出只有在"阳光下"交易,才能迸发出市场活力。要加强沟通协作,减少人民群众的内部矛盾,盘活农村集体资产,促进农村
目的:本研究旨在通过检测发育性髋关节脱位矫治术(DDH)患儿围手术期血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、血清心肌损伤标志物心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)
本文对几种经典的软件体系结构风格进行了具体的阐述,分析了各种风格的特点、优缺点,最后重点介绍了三层C/S欺件体系结构。
2017年9月20日~21日,浙江省衢州市无线电管理局组织召开“黑乌”侦测系统集成改造项目验收会。浙江省经信委无线电管理局及杭州市、金华市无线电管理局的领导专家和项目承建方
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield