目的:牙周病属于慢性炎症性疾病的一种,口腔菌群失调是其主要的致病因素。研究已经证明牙周病是多种消化系统疾病的危险因素。牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）是牙周病的主要致病菌,被认为与消化系统疾病的发生和发展密切相关。文献证实长期灌饲P.gingivalis,小鼠的肠道稳态被打破,肠道菌群失调,促炎因子表达升高,紧密连接相关蛋白表达下降。然而,P.gingivalis作用于肠道上皮屏障的具体机制尚不清楚。当下,高脂饮食逐渐成为主流的饮食习惯。过多的脂肪摄入可诱发肠道炎症,降低肠道屏障对有害因素的抵抗力。标志性炎症因子如肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和干扰素（interferon,IFN）-γ已被证明会增加肌球蛋白轻链激酶（myosin light chain kinase,MLCK）的表达,上调MLC磷酸化的水平,进而导致细胞骨架收缩和引起紧密连接的结构改变。在本研究中,我们对高脂饮食小鼠灌饲P.gingivalis,检测肠道炎症及紧密连接的变化,探讨P.gingivalis作用于肠道紧密连接的可能机制。方法:选择6-8 w C57BL/6小鼠作为实验对象,将其随机分为4个组别:基础饮食组SC-P.g（-）,基础饮食灌饲组SC-P.g（+）,高脂饮食组HF-P.g（-）和高脂饮食灌饲组HF-P.g（+）。每日称重后,对SC-P.g（+）和HF-P.g（+）组小鼠灌饲1×10~9CFU的P.gingivalis（0.2 m L PBS重悬）,而SC-P.g（-）和HF-P.g（-）组灌饲等体积的PBS。9周后,处死小鼠,提取回肠和结肠组织。1.q RT-PCR及Western blot检测回肠和结肠组织中Occludin、ZO-1的m RNA水平和蛋白水平表达量。2.免疫荧光对回肠组织紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的分析。3.q RT-PCR检测回肠组织中TNF-α、IFN-γ的m RNA表达水平。通过H＆E染色,在光镜下观察回肠组织。4.q RT-PCR及免疫组化检测回肠组织中MLCK的表达水平,免疫组化检测回肠组织中p-MLC的含量。结果:1.灌饲P.gingivalis使高脂饮食小鼠紧密连接破坏:在高脂饮食小鼠中,回肠组织的紧密连接蛋白ZO-1在上皮细胞中定位发生显著改变且Occludin的蛋白表达水平降低并具有统计学差异。HF-P.g（+）组小鼠的回肠组织中,ZO-1和Occludin的改变更为显著。2.灌饲P.gingivalis导致高脂饮食小鼠回肠上皮炎症:回肠H＆E染色结果显示高脂饮食小鼠的回肠组织炎症细胞增多,炎症因子TNF-α、IFN-γ表达水平上调;灌饲P.gingivalis可使肠道炎症反应进一步加重。3.灌饲P.gingivalis进一步上调高脂饮食小鼠回肠组织中MLCK/p-MLC信号分子的表达水平:高脂饮食小鼠的回肠组织中,MLCK、p-MLC表达显著增加,P.gingivalis使MLCK通路相关信号分子的表达水平变化更为显著。结论:灌饲P.gingivalis加重高脂饮食小鼠回肠组织中炎症反应以及紧密连接的破坏,并且P.gingivalis的致病作用可能与TNF-α/IFN-γ激活MLCK/p-MLC信号通路相关。