低分子量姬松茸多糖对Mφ免疫活性的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoujans
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目的:研究从姬松茸中分离纯化的低分子量姬松茸多糖(Agaricus blazei Murill Polysaccharide-AWA1,ABP-AWA 1)对小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophages,Mφ)吞噬和分泌功能的影响,进而探讨ABP-AWA1对机体免疫功能的调节作用。方法:昆明小鼠腹腔注射5%可溶性淀粉1mL,3d后从小鼠腹腔分离与纯化Mφ,以 RPMI-1640 培养液处理细胞为正常对照组、以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理细胞为阳性对照组、以不同浓度的ABP-AWA1(75μg/mL、150μg/mL、300μg/mL)处理细胞为药物处理组;中性红法测定小鼠腹腔Mφ的吞噬功能;Griess法测定NO的分泌量;酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA 法)测定 IL-1β、IL-6、IL-12p70、TNF-α 的分泌量,以 1 50μg/mLABP-AWA1 作用下,检测不同培养时间Mφ的NO及IL-1β、IL-6、IL-12 p70、TNF-α分泌量的影响;实时荧光定量PCR法检测细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α mRNA的表达水平。结果:Mφ吞噬能力检测结果显示:ABP-AWA1能明显提高小鼠腹腔Mφ对中性红的吞噬能力(P<0.05),当ABP-AWA1的浓度为150 μg/mL时,吞噬能力最强。ABP-AWA1 对小鼠腹腔 Mφ释放NO 的影响结果显示:ABP-AWA1能显著提高小鼠腹腔Mφ释放NO(P<0.05),当ABP-AWA1的浓度为1 50 μg/mL时,NO的释放量最大。在考察培养时间对NO的释放量影响时发现:培养48h以后NO的释放量趋于平稳。ELISA法对Mφ分泌细胞因子水平的影响结果显示:ABP-AWA1能显著促进Mφ分泌细胞因子IL-1 β、IL-6、IL-12p70、TNF-α;在考察培养时间对细胞因子分泌量影响时发现:培养48h后Mφ分泌细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12p70的水平变化不显著(P>0.05),细胞因子TNF-α出现的峰值时间是培养24h。实时荧光定量PCR对细胞因子mRNA表达的影响结果显示:ABP-AWA1可显著上调Mφ中细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α 的 mRNA表达(P<0.05)。结论:1.ABP-AWA1能刺激活化小鼠腹腔Mφ,增强其吞噬能力,从而提高机体的免疫力。2.ABP-AWA1能提高小鼠腹腔Mφ分泌NO及细胞因子 IL-1β、IL-6、IL-12 p70、TNF-α 的能力,并促进 IL-1β、IL-6、IL-12 p40、TNF-α mRNA的表达。提示ABP-AWA 1可能通过调节细胞因子的分泌和表达,来发挥其免疫调节作用。
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