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研究目的: 树突状细胞(Dendritic cell.DC)是体内最主要的抗原提呈细胞(APC)之一,也是体内功能最强大的抗原提呈细胞。在初级免疫反应中,DC既能激活CD4~+T细胞又能激活CD8~+T细胞,同时还可以促进B细胞生成抗体,刺激Th细胞及NK细胞活化。外周DCs能够捕获处理抗原,表达共同刺激分子,启动机体免疫应答,在机体免疫应答中具有重要作用。基于DC在抗肿瘤免疫中的重要性,近年来DC介导的肿瘤免疫越来越受到重视,但如何进一步增强DC介导肿瘤抗原的特异性和有效性一直是人们关注的问题。国内外已有许多动物实验证明将DCs在体外诱导活化制成DCs疫苗,然后回输治疗,可以诱导机体产生特异性CTL,产生保护性免疫反应。国外已有学者利用此方法在临床上治疗黑色素瘤,前列腺癌和肾细胞癌等肿瘤,取得初步疗效。研究表明,应用抗原或抗原多肽在体外冲击致敏DC,可有效地诱导抗肿瘤免疫反应。本研究拟体外诱导培养DC,经不同类型的白血病细胞抗原活化,对比观察不同白血病细胞抗原诱导产生的CTL及对肿瘤细胞的杀伤效应。研究内容: 一 DC诱导培养及生物学性质研究 利用健康人外周血单个核细胞作为前体细胞,在GM-CSF(1000U/ml)IL-4(500U/ml)和TNF-α(500U/ml)作用下诱导生成DC并分化成熟。显微镜下观察不同分化阶段树突状细胞形态,流式细胞仪检测DC表面标记。 二 DC介导的不同白血病细胞的杀伤效应 用尼龙棉柱分离健康人外周血T细胞,与肿瘤细胞抗原提取物致敏的DCs共同培养后诱导产生特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),混合培养72小时,