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以小鼠和猪为实验动物,主要采用体外培养、药物处理、激光共聚焦显微术、免疫蛋白印迹以及抗体注射等方法研究了PKC在卵母细胞减数分裂、受精和胚胎早期发育过程中的表达,分布和作用。并研究卵母细胞成熟之前GV期精子的穿透是否影响MAPK磷酸化和减数分裂细胞周期进程。脊椎动物卵母细胞的减数分裂和受精过程受到多种蛋白激酶的调节。近年来对于卵母细胞成熟、活化和受精的分子机制研究取得了很大进步,蛋白激酶C(PKC)是广泛分布在真核生物体内的丝/苏氨酸蛋白激酶家族,有证据证明PKC在哺乳动物卵母细胞减数分裂成熟和活化过程中起着关键性的作用。然而很少了解PKC和PKC亚形在上述过程中所发挥的作用机制。我们揭示了小鼠卵和早期胚胎的:1)减数分裂和有丝分裂过程中PKC的调节机制;2)经典型PKC亚类在这些过程中的作用;3)从卵母细胞GV期发育到胚胎的胚泡期PKCα亚形的亚细胞定位。研究结果显示PKC激活剂PMA不仅依靠经典型PKC也依靠其他PKC亚形抑制小鼠裸卵减数分裂的恢复。GVBD以后发生的PKC活化作用导致MAPK磷酸化的抑制并使细胞周期阻滞在MI期。PKC活化也引起受精卵第二极体排出的失败。PKC(亚形集中在MI期前浓缩的染色体周围,也位于受精卵原核或早期胚胎分裂球的核。受精卵中原核的形成被PKC抑制剂钙感光蛋白C而不是被cPKC –特效抑制剂Go 6976抑制。PMA引起PKC活化时间延长导致早期胚胎的分裂被阻断。所有这些结果都说明PKC在小鼠卵母细胞和胚胎的细胞周期进程中具有多重功能。不同成熟阶段的猪卵与精子融合后体外培养发现:(1)不同成熟阶段的猪卵母细胞都可被精子穿透;(2)精子穿透不影响减数分裂细胞周期进程;(3)精子穿透GV期卵母细胞和正在成熟的卵母细胞不改变MAPK磷酸化:(4)已受精的前中期I(pre-MI)和中期I(MI)卵母细胞的MAPK有活性,MAPK不像MII卵母细<WP=6>胞那样受精后发生磷酸化。结果显示卵母细胞成熟之前精子的穿透并不影响MAPK磷酸化和减数分裂进程,卵母细胞成熟后才获得失活MAPK的机制。