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目的：体外分离、培养、鉴定人脐带间充质干细胞，并行成骨方向诱导。同时构建羟基磷灰石/胶原支架材料，观察与其生物相容性。检测人脐带间充质干细胞复合羟基磷灰石/胶原支架材料构建组织工程骨修复骨缺损的效果。方法:采用经典酶消化法分离、培养人脐带间充质干细胞，通过细胞传代培养、扩增。使用光学显微镜及原子力显微镜观察细胞形态特征。用MTT法检测细胞活性、细胞增殖曲线，用流式细胞仪检测细胞免疫表型。用化学药物法行体外成骨方向诱导，并行特异性染色鉴定。制备羟基磷灰石/胶原支架材料，并将人脐带间充质干细胞与支架材料复合联合培养，于体外行成骨诱导培养2周，MTT法测增殖曲线，光镜、扫描电镜观察细胞粘附、成长情况，并评价其组织相容性。行动物实验，通过对照实验，将复合的组织工程骨植入兔股骨髁上，通过形态学、影像学、组织学等检测手段观察其对骨缺损的修复效果。结果:采用经典酶消化法可以成功分离、培养、纯化人脐带间充质干细胞。MTT检测显示细胞成长增殖能力强。流式细胞仪分析检测第3代细胞均强烈表达CD13、CD29、CD44、 CD54、 CD73、 CD90、CD105，不表达CD14、 CD31、 CD34、 CD40、 CD45和HLA一DR。原子力显微镜观察可见人脐带间充质干细胞具有成熟的间充质干细胞特性。人脐带间充质干细胞经成骨诱导分化后，碱性磷酸酶染色呈强阳性，茜素红染色可见明显钙结节。MTT法、光镜、扫描电镜示成骨细胞在羟基磷灰石/胶原支架材料上吸附、增殖能力好，具有良好组织相容性。构建的组织工程骨通过影像学、组织学、形态学检测在兔体内可异位成骨，并能够成功修复大段骨缺损。结论:成功构建了一种可以稳定分离、培养、增殖人脐带间充质干细胞的方法。所培养的细胞纯度高，增殖快，生物学形状稳定，并能在体外成功诱导为成骨细胞。可以成功的在羟基磷灰石/胶原支架材料中吸附、增殖。是一种具有良好生物相容性的支架材料。与之构建的组织工程骨也可以在动物体内成功的异位成骨，达到修复大段骨缺损的效果。