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目的：南五味子（SSF）和北五味子（SCF）在传统中医中常作为滋补药使用，近年研究表明五味子具有保护心肌的作用，但是具体的药效成分不明。本课题建立心肌细胞膜-液质联用的分析方法对南北五味子的活性成分进行了筛选，并系统观察了活性成分对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法：首先建立心肌细胞膜色谱-液质离线联用的分析方法（CM/CMC-Offline-LC/MS），并用此方法筛选、鉴定南北五味子提取物中的活性成分。此方法是采用大鼠心室肌细胞制备心肌细胞膜（CM/CMC）色谱柱的固定相；采用阳性药物对照品尼群地平（NT）、硝苯地平（NF）和阴性药物对照品格列齐特（GC）、格列美脲（GM）考察CM/CMC-Offline-LC/MS方法的适用性和可靠性；将SCF和SSF提取物分别进入CM/CMC色谱系统进行分离、筛选；收集CM/CMC上的保留组分，在优化条件下进入液质（LC/MS）系统进行分析、鉴定活性成分。其次，通过超声分散-高压纳米机法分别制备五味子甲素（DSD）、五味子酯甲（STA）静脉注射亚微乳剂，该乳剂以大豆卵磷脂为乳化剂、注射用油为油相。并采用高效液相色谱法测定了DSD和STA的含量。最后，构建大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型，系统观察了DSD和STA对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。实验中以雄性Wistar大鼠经可逆性结扎左冠状动脉前降支建立在体心肌缺血/再灌注损伤模型，分别尾静脉注入DSD和STA乳剂，通过测定心功能、心肌梗塞面积、生化指标、组织病理学、心肌细胞凋亡以及心肌中caspase-3蛋白、gp91phoxmRNA表达的变化；分离新生大鼠心肌细胞，DSD或STA预处理后再以H2O2损伤，用流式细胞术测定细胞的凋亡情况，考察DSD和STA对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。结果：通过CM/CMC-Offline-LC/MS方法从SSF、SCF中筛选出的活性成分DSD和STA可以与心肌细胞膜结合，提示其可能具有保护心肌的作用。课题所制得的静脉注射亚微乳剂含量稳定，且克服了DSD和STA溶解度差的问题。药理实验结果表明：(i) DSD和STA可明显减轻缺血/再灌注后LVSP、LVEDP、±dp/dtmax和心律失常指标的异常变化，显示有改善心功能效应；(ii) DSD和STA能减小心肌梗塞面积，降低MDA的释放，增加SOD活力，显示有减轻心肌损伤的效应；(iii)3.组织形态学观察和心肌纹理分析也表明DSD和STA有减轻心肌组织病理损害的作用；(iv)与缺血再灌注组比较，DSD和STA可显著减少心肌细胞凋亡（由缺血/再灌注组的33.56±2.58%减少为10.28±2.80%和10.98±1.99%），并降低caspase-3的活性（由缺血/再灌注组的0.62±0.02OD/mg减少为0.38±0.02OD/mg和0.32±0.02OD/mg），提示DSD和STA可能具有保护心肌细胞的效应；(v)研究结果表明DSD、STA和阳性对照药美托洛尔可以改善心肌缺血/再灌注损伤，并且作用相似。(vi)体外研究表明，DSD或STA可以明显降低H2O2引起的新生大鼠心肌细胞凋亡。结论：研究结果表明，所建立的CM/CMC-Offline-LC/MS分析方法筛选得到的DSD和STA可以明显减轻由缺血/再灌注引起的心肌损伤，并初步阐明其保护机理可能与抑制心肌细胞凋亡有关。本研究提示DSD和STA对治疗缺血性心脏疾患具有潜在的临床应用价值。