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目的:本课题通过研究肾病综合征大鼠体内钠潴留情况,讨论潴留的Na+在体内的存储位置及机制,进一步研究当归芍药散对肾病综合征对钠潴留的调节机制。方法:第一部分肾病综合征大鼠体内钠分布的初步研究（1）16只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组。采用两次尾静脉注射阿霉素（第1周4mg/kg、第2周2mg/kg）方法建立肾病综合征模型。（2）代谢笼收集大鼠12h尿液,试剂盒检测尿蛋白,肌酐及Na+含量。（3）全自动生化分析仪检测血清肾功能指标尿素氮（BUN）、肌酐（CR）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）。（4）试剂盒检测血浆Na+水平。（5）烘干法检测大鼠皮肤含水量;（6）原子吸收光谱法检测皮肤钠含量。第二部分肾病综合征大鼠体内钠分布变化的机制研究（1）40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、高盐组、阿米洛利组和乐伐替尼组。除正常组和高盐组外,其余各组均采用两次尾静脉注射阿霉素（第1周4mg/kg、第2周2mg/kg）方法建立肾病综合征模型;阿米洛利和乐伐替尼组分别灌胃阿米洛利和乐伐替尼,高盐组喂食高盐饲料,连续四周。（2）谢笼收集大鼠12h尿液,试剂盒检测尿蛋白,肌酐及Na+含量。（3）试剂盒检测血浆Na+水平。（4）烘干法检测大鼠皮肤含水量;（5）原子吸收光谱法检测皮肤钠含量;（6）酶联免疫吸附法（ELISA）检测糖胺聚糖（Glycosaminoglycan,GAGs）含量;（7）流式细胞术检测肾皮质巨噬细胞含量;（8）免疫印迹法（Western blot,WB）检测肾皮质张力反应性增强因子结合蛋白（Ton EBP）,血管内皮生长因子C（VEGFC）,血管内皮生长因子受体3（VEGFR3）,淋巴管内皮细胞受体-1（LYVE-1）表达;（9）RT-PCR检测肾皮质VEGFC m RNA、VEGFR3 m RNA表达情况;（10）免疫荧光法检测肾皮质淋巴管密度。第三部分当归芍药散对肾病综合征大鼠体内钠分布变化的影响（1）56只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阿米洛利组、乐伐替尼组和当归芍药散高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组均采用两次尾静脉注射阿霉素（第1周4mg/kg、第2周2mg/kg）方法建立肾病综合征模型;阿米洛利组、乐伐替尼组和当归芍药散高、中、低剂量组,分别灌胃给药阿米洛利、乐伐替尼和当归芍药散高、中、低剂量,连续四周。（2）代谢笼收集大鼠12h尿液,试剂盒检测尿蛋白,肌酐及Na+含量。（3）全自动生化分析仪检测血清肾功能指标BUN、CR、TC、TG、TP、ALB;试剂盒检测血浆Na+水平。（3）烘干法检测大鼠皮肤含水量。（4）原子吸收光谱法检测皮肤钠含量。（5）ELISA法检测GAGs含量。（6）流式细胞术检测肾皮质巨噬细胞含量。（7）Western blot检测肾皮质Ton EBP、VEGFC、VEGFR3、LYVE-1表达。（8）RT-PCR检测肾皮质VEGFC m RNA、VEGFR3 m RNA表达情况。（9）免疫荧光法检测肾皮质淋巴管密度。结果:第一部分肾病综合征大鼠体内钠分布的初步研究（1）模型组大鼠尿蛋白排泄增高,且肾功能、血脂指标异常,提示模型建立成功。（2）模型组大鼠尿Na+排泄下降,血浆Na+水平无显著差异。（3）模型组皮肤钠含量显著升高,皮肤钠含水量无显著差异。第二部分肾病综合征大鼠皮肤钠含量变化的机制研究（1）与正常组相比,模型组大鼠尿蛋白排泄升高,尿Na+排泄下降;肾皮质巨噬细胞含量增加,Ton EBP、VEGFC、VEGFR3、LYVE-1表达增加,VEGFCm RNA、VEGFR3m RNA表达增加,淋巴管密度增加;皮肤钠含量、皮肤钠含量/湿重、皮肤钠含量/干重、GAGs含量均显著增加;高盐组大鼠尿蛋白排泄无明显差异,尿钠排泄增加。（2）与模型组相比,乐伐替尼和阿米洛利组尿蛋白排泄降低,尿Na+排泄上升;肾皮质巨噬细胞含量降低,Ton EBP、VEGFC、VEGFR3、LYVE-1表达下降,VEGFC m RNA、VEGFR3 m RNA表达下降,淋巴管密度下降;皮肤钠含量、皮肤钠含量/湿重、皮肤钠含量/干重、GAGs含量均显著降低;高盐组大鼠肾皮质肾皮质巨噬细胞含量降低,Ton EBP、VEGFC、VEGFR3、LYVE-1、VEGFC m RNA、VEGFR3 m RNA表达以及淋巴管密度无显著性差异;皮肤钠含量、GAGs含量增加,皮肤钠含量/湿重、皮肤钠含量/干重降低。（3）各组间皮肤含水量百分比无显著性差异。第三部分当归芍药散对肾病综合征大鼠体内钠分布变化的影响（1）当归芍药散可显著降低肾病综合征大鼠尿蛋白排泄量,增加尿Na+排泄。（2）当归芍药散可显著改善肾功能及血脂紊乱。（3）当归芍药散可显著降低肾皮质巨噬细胞含量。（4）当归芍药散可显著降低肾皮质Ton EBP、VEGFC、VEGFR3、LYVE-1以及VEGFC m RNA、VEGFR3m RNA表达。（4）当归芍药散可显著降低肾皮质淋巴管密度。（5）当归芍药散可显著降低皮肤钠含量、皮肤钠含量/湿重、皮肤钠含量/干重;结论:（1）NS大鼠体内存有明显钠潴留现象,潴留的Na+引起肾组织间质的渗透压变化,刺激巨噬细胞向肾皮质组织间质聚集,进一步激活Ton EBP/VEGFC/VEGFR3通路,促进淋巴管扩张,将潴留的Na+转运至皮肤中与皮肤中的GAGs结合,达到存储目的。（2）DSS可能通过抑制巨噬细胞的聚集,降低Ton EBP/VEGFC/VEGFR3的表达,抑制Na+通过淋巴系统转运存储至皮肤,降低皮肤钠的含量。