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目的:1、检测siha细胞中是否有HPV16E7基因和HPC2基因表达;2、通过si RNA干扰技术对siha细胞中E7基因和HPC2基因进行沉默,观察HPV16 E7基因与HPC2基因两者之间的关系;3、观察HPC2基因沉默后对siha细胞增殖、凋亡方面的影响。初步探索HPC2基因在HPV16感染的宫颈癌发病机制中与E7基因之间的联系以及HPC2在宫颈癌发生发展中可能的机制。方法:1、体外培养HPV16感染的宫颈癌细胞(siha细胞);2、应用RT-PCR检测siha细胞中是否存在E7基因和HPC2基因;3、设计si RNA干扰序列,在siha细胞中分别沉默E7基因和HPC2基因;4、应用RT-PCR和Q-PCR技术检测si RNA干扰片段对siha细胞中目的基因的沉默效率;5、应用Q-PCR技术检测沉默E7基因后的siha细胞株中HPC2基因表达情况;6、应用Western-blot检测沉默E7基因后siha细胞中HPC2蛋白的表达情况;7、应用CCK8检测HPC2基因沉默后siha细胞的增殖情况;8、应用流式细胞技术检测HPC2基因沉默后siha细胞的凋亡情况。结果:1、HPV16感染的siha细胞中存在HPVE7基因和HPC2基因;2、通过si RNA干扰技术能有效沉默siha细胞中E7基因(抑制效率:67%左右)和HPC2基因(抑制效率:70%左右);3、E7基因沉默后的siha细胞中HPC2在m RNA水平和蛋白水平均下调;4、CCK8试验结果显示:HPC2基因被沉默后siha细胞增殖下调,与E7基因沉默后对siha细胞增殖的影响相似;5、细胞凋亡检测结果显示:HPC2基因沉默后细胞凋亡比例增加,与E7基因沉默后对siha细胞凋亡的影响相似。结论:1、siha细胞中有HPC2基因和E7基因表达;2、si RNA干扰技术可以有效抑制目的基因的表达;3、E7基因可调控HPC2基因的表达;4、HPC2在siha细胞中参与了增殖、凋亡的调控;5、HPC2对细胞增殖、凋亡的调控可能是HPV16感染细胞后导致恶性行为的途径之一。