广东省种禽场沙门菌流行病学调查及分子分型研究

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沙门菌是一类重要的人兽共患病原菌,其宿主范围广泛,可引起人和动物多种急性或慢性传染病,其中动物源沙门菌对畜禽养殖和人类健康构成严重的威胁,具有重要公共卫生意义。种禽场是控制沙门菌流行的重要环节,也是开展沙门菌净化的“源头”,本研究对广东省不同种禽场进行沙门菌流行病学调查,并对沙门菌分离株进行药物敏感性试验,分析其耐药基因和毒力基因,并挑选部分菌株进行PFGE分子分型,以期为种禽场沙门菌的防控和净化、临床用药及风险点控制提供科学依据。在2018年3月至2019年7月,本研究从广东省7个地区16个种禽场采集2525份样本,共分离到357株沙门菌(分离率14.14%),其中肛拭子样本3株(1.00%),环境样本30株(13.39%),死胚样本324株(16.20%);包括鸡源321株(19.77%),鹌鹑源2株(11.11%),鹅源1株(2.44%)。357株沙门菌共鉴定出12种血清型,死胚中的主要血清型为鸡白痢沙门菌,环境中的主要血清型为德尔卑沙门菌;药敏结果显示16种抗菌药物中,耐药率最高的是磺胺异恶唑(97.76%),其次分别是萘啶酸(92.72%)、氨苄西林(91.32%)、四环素(40.62%)等,且多重耐药率高达95.24%,主要耐药谱为AMP-NAL-SF。对357株沙门菌进行22种耐药基因检测,结果显示β-内酰胺类以blaTEM基因检出率最高,达98.32%,磺胺类耐药基因以sul2(93.84%)基因检出率最高,四环素类耐药基因以tet A(46.50%)基因为主,310株沙门菌喹诺酮类耐药决定区(QRDR)存在gyr A单突变,其中81.29%的菌株在83位显示突变,18.71%的菌株在87位显示突变,而质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)中,仅有少量菌株检测到qnr S(4.76%)和qnr B基因(0.28%),质粒基因编码的外排泵蛋白中,有7.84%和6.44%的沙门菌检测出oqx A、oqx B基因;毒力基因检测结果显示,除SPI-2上sse L基因(51.3%)检出率较低外,其他毒力基因(spv A、spv B、spv C、spv D、spv R、mog A、mgt C、bcf A、ara B、stn、fim A)携带率均在89.1%以上,表明各沙门菌分离株普遍携带大量毒力基因。随机选取种禽场死胚中的100株鸡白痢沙门菌和25株不同来源的沙门菌进行PFGE分型,结果显示菌株之间相似性分别为66.01%~100%及54.63%~100%,既具有基因相似性,又存在遗传多样性,且不同种禽场及不同来源的沙门菌分离株之间存在相同基因型,具有交叉污染的风险。综上所述,本研究对广东省种禽场死胚及环境中的沙门菌进行了系统的流行病学调查,发现所调查的93.75%的种禽场均存在沙门菌污染,且95.24%的菌株存在多重耐药现象,提示种禽场孵化环节及其养殖环境已受到沙门菌污染,需在养殖过程中加强种源净化,改变用药习惯,并根据药物敏感性结果合理选择并交替使用敏感的抗菌药物;另外种禽场中人兽共患沙门菌的存在对畜禽及其养殖人员均存在感染风险,因此建议种禽场加强饲养管理,做好生物安全措施。本研究结果对广东省种禽场沙门菌的感染及耐药概况有了进一步的认识,可为种禽场制定和实施沙门菌防控、净化措施提供参考。
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