DNA甲基转移酶2(DNMT2)最初被认为是DNMTs家族中的一员,后来发现在不同物种中的DNMT2的DNA甲基化活性非常的弱或是检测不到,Goll和他的同事们证实了 DNMT2是一个RNA甲基转移酶,能够在小鼠、拟南芥和果蝇中甲基化tRNAAsp反密码子环的C38位点。在对于DNMT2与先天免疫通路关系的研究中,Zeljko Durdevic证实了 DNMT2是果蝇有效的先天免疫反应应答中所必需的,DNMT2突变体在果蝇中会造成果蝇C病毒的积累并激活先天免疫应答,而在哺乳动物中尚未发现DNMT2在先天免疫中所起的作用。对微生物核酸的识别是免疫系统检测病原体的主要机制之一。因此,我们研究了 DNMT2在DNA识别cGAS-STING免疫通路中的作用。我们通过CRISPR/Cas9敲除技术,在胃癌细胞AGS、人成纤维细胞BJ、鼠成纤维L929细胞中成功敲除了DNMT2基因,获得了纯的敲除细胞株。对野生型细胞和敲除细胞进行HT-DNA、cGAMP刺激后,发现敲除DNMT2会降低IFNβ及其相关基因的表达量,表明了DNMT2对cGAS-STING通路起正调控作用。通过Western blot和免疫荧光等实验表明,DNMT2的缺失会导致STING蛋白表达的降低,且影响STING在细胞内的分布形态,从而抑制cGAS-STING通路。为了探索其中的机制,我们进行了 N6-甲基腺苷(m6A)甲基化的检测,结果证明DNMT2的缺失会使得m6A的甲基化程度升高,而转录后的RNA中相对高的m6A含量会影响RNA的代谢过程。DNMT2的缺失降低IFN β的表达,用PRV感染野生型细胞和敲除细胞,发现敲除DNMT2会使细胞抵御病毒的能力变弱,细胞更容易死亡。因此我们认为缺乏DNMT2明显损害了细胞内DNA诱导的免疫反应。DNMT2对STING是必不可少的,能够影响STING的功能,且可能与m6A修饰相关。这些研究为揭示DNMT2在DNA识别cGAS-STING免疫通路中的作用及相应的免疫应答调控机制打下了坚实的基础。