阪崎克罗诺杆菌（Cronobacter sakazakii）是一种革兰氏阴性无芽孢,具有周生鞭毛的棒状杆菌,其能够导致新生儿患菌血症、坏死性小肠结肠炎（NEC）和脑膜炎等致死率高达50～80%的疾病。另外婴幼儿配方乳粉是阪崎克罗诺杆菌污染及疫情爆发的主要传播介质及食物来源,因此寻求一种高效安全的婴幼儿乳粉中阪崎克罗诺杆菌的控制技术势在必行。热杀菌、电子束照射、红外杀菌及UV辐照等多种技术已被应用于或者正在被尝试应用于乳粉及其他食品中阪崎克罗诺杆菌的控制,但是目前阪崎克罗诺杆菌的控制技术会对乳粉的营养品质及感官特性造成严重的影响,从而不被消费者所接受。另外近年来部分研究者将目光投向于使用植物源活性物质抑制婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌,然而,单纯使用植物源活性物质也具有浓度高、成本贵、气味大等缺点,使其在婴幼儿乳粉中的进一步应用受到限制。因此,探索安全、经济、高效而又不易对产品品质造成严重损害的控制技术及抗感染分子机制,对婴幼儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的防控以及进一步应用具有重要的实际意义。LED（light emitting diode,LED）作为一种低温、高效、绿色的新型杀菌技术逐渐引起了人们的关注。405 nm LED已被证实具有广谱的杀菌效果,并且相比紫外辐照杀菌对人体具有较高的安全性。但是关于405 nm LED的具体抑菌及抗感染分子机制研究较少且深度不够,难以使其在食品工业产业链中得到进一步的应用。因此,本研究在通过构建阪崎克罗杆菌污染的婴幼儿乳粉模型及PBS模型的基础上,研究了405 nm LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌的抑杀作用,405 nm LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌环境耐受能力的影响,405 nm LED对阪崎克罗诺杆菌与宿主细胞相互作用的影响,以及405 nm LED对阪崎克罗诺杆菌相关环境耐受基因及毒力基因表达的影响。具体研究内容及结果如下:1.阪崎克罗诺杆菌污染的婴幼儿乳粉模型的构建及LED亚致死辐照剂量的确定实验设计及制作了LED杀菌装置,随后构建了阪崎克罗诺杆菌污染的婴幼儿乳粉模型,并确定了不同功率405 nm LED相应对照组的孵育温度,进而测定了不同功率405 nm LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌的抑杀效果,从而确定了LED的亚致死辐照剂量,实验还进一步测定了不同功率405 nm LED辐照过程中乳粉中阪崎克罗诺杆菌受损率的变化。实验结果表明:10W、20W LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌的抑杀效果之间并无显著性差异;10W、20W LED处理480 min后菌体的受损率达到最大,并与相应的对照组相比具有显著性差异,同时呈一定的辐照剂量依赖性。2.LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌环境耐受能力的影响实验模拟了干燥、高温、胃酸、胆盐等一系列阪崎克罗诺杆菌在婴幼儿乳粉生产加工、冲调以及食用后进入人体胃肠道等各个环节所面对的极端环境,测定了405 nm LED对乳粉中阪崎克罗诺杆菌在不同不良环境下耐受能力的影响。实验结果表明:405 nm LED显著降低了乳粉中阪崎克罗诺杆菌对干燥、热、胃酸、胆盐等不良环境的耐受能力。3.LED对阪崎克罗诺杆菌与宿主细胞相互作用能力的影响实验构建了阪崎克罗诺杆菌污染的PBS模型,随后确定了10W LED在PBS体系中相应对照组的孵育温度,进而测定了405 nm LED对PBS中阪崎克罗诺杆菌的抑杀效果,最后探究了405 nm LED对阪崎克罗诺杆菌黏附侵入Caco-2细胞及其在巨噬细胞RAW 264.7内存活与繁殖能力的影响。实验结果表明:经405 nm LED处理后的阪崎克罗诺杆菌对Caco-2细胞的黏附能力下降但其侵入能力却增强。同时405 nm LED可以显著提高阪崎克罗诺杆菌在巨噬细胞RAW 264.7内的存活及繁殖能力。4.LED调控阪崎克罗诺杆菌致病能力的分子机制实验通过激光共聚焦显微镜观察了405 nm LED对阪崎克罗诺杆菌细胞膜的影响,并利用RT-PCR技术测定了405 nm LED对阪崎克罗诺杆菌环境耐受基因及毒力基因的影响。实验结果表明:405 nm LED处理后的阪崎克罗诺杆菌的细胞膜完整性受到了破坏。osm Y、dnak、grx B、hfq、fur、omp C、mfla、gro ES、rpos等8个与阪崎克罗诺杆菌环境耐受能力相关的基因均显著下调。omp A、omp X、uvr Y等三个与黏附侵入的相关的毒力基因,其中omp A显著上调,而omp X、uvr Y等两个基因表达量下降。与阪崎克罗诺杆菌在巨噬细胞中存活增殖能力相关的基因sod显著上调。