戊四氮诱导大鼠癫痫模型建立和多药耐药基因产物PGP和MRP1表达的研究

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目的:1建立戊四氮腹腔注射诱导的大鼠急性癫痫发作的模型,用苯巴比妥钠干预,观察大鼠癫痫发作表现;观察癫痫发作后大鼠脑内病理改变。2探索大鼠脑内表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)是否增强,出现时间,以及PGP表达是否与癫痫发作、苯巴比妥钠应用有关;3探索大鼠脑内表达多药耐药相关蛋白-1(multi-drug resistance associated protein-1,MRP1)是否增强,出现时间,以及MRP1表达是否与癫痫发作、苯巴比妥钠应用有关。方法:1致痫组大鼠予以戊四氮(40mg~60mg/kg),采用腹腔注射方法,诱发大鼠急性癫痫发作模型;干预组大鼠分为前干预组、后干预组,分别在戊四氮注射前0.5小时和后10分钟加用苯巴比妥钠腹腔注射(40mg/kg);假模型组大鼠给予生理盐水腹腔注射(2ml/只);空白对照组不予任何处理;观察所有大鼠癫痫发作与否、发作类型、起始时间、持续时间。获取大鼠脑组织标本(以海马为中心冠状切片),进行HE染色。2运用免疫组织化学技术比较空白对照组、假模型组、诱发癫痫6小时、24小时、3天、5天和7天后致痫组和干预组大鼠脑内(以海马为中心冠状切片)PGP表达。试图探索大鼠脑内PGP是否增强,出现时间,以及PGP过度表达是否与癫痫发作、苯巴比妥钠有关。3运用免疫组织化学技术比较空白对照组、假模型组、诱发癫痫6小时、24小时、3天、5天和7天后致痫组和干预组大鼠脑内(以海马为中心冠状切片)MRP1蛋白水平的表达。试图探索大鼠脑内表达MRP1是否增强,出现时间,以及MRP1过度表达是否与癫痫发作、苯巴比妥钠有关。结果:1戊四氮腹腔注射建立的大鼠急性癫痫发作模型,其表现与人类癫痫发作相似;干预组大鼠癫痫发作程度轻,持续时间短;空白对照组、假模型组大鼠无癫痫发作。癫痫发作后大鼠脑内病理改变明显。2 PGP的表达:致痫组大鼠脑内检测到较高水平的PGP表达,表达高峰在癫痫发作后第24小时;干预组大鼠PGP表达较低;空白对照组、假模型组大鼠脑内PGP仅有微量表达;致痫组大鼠癫痫发作后第6小时、24小时、3天、5天和7天后脑内PGP表达与空白对照组、假模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组大鼠癫痫发作后第24小时、3天、5天和7天脑内PGP表达与空白对照组、假模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);PTZ致痫组、后干预组与前干预组比较差异有统计学意义(P<0.01)。3 MRP1的表达:致痫组大鼠脑内检测到较高水平的MRP1表达,表达高峰在癫痫发作后第7天;干预组大鼠MRP1表达较低;空白对照组、假模型组大鼠脑内无MRP1表达。致痫组、前干预组大鼠癫痫发作后第6小时、24小时、3天、5天和7天脑内MRP1表达与空白对照组、假模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);后干预组大鼠癫痫发作后第24小时、3天、5天和7天脑内MRP1表达与空白对照组、假模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);PTZ致痫组与后干预组、前干预组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1戊四氮腹腔注射可以诱导建立与人类癫痫发作类似的急性癫痫发作的模型,抗癫痫药物苯巴比妥钠可以减轻大鼠癫痫发作的严重程度;2癫痫发作将引起动物模型脑内PGP和MRP1表达增加,与癫痫发作程度、持续时间、苯巴比妥钠干预有关;苯巴比妥钠通过影响癫痫发作来影响PGP和MRP1的表达。
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