研究背景：　　 卵巢癌严重威胁着广大妇女的健康,起病隐匿,尚缺乏有效地预防和筛查手段,大多数患者就诊时已届晚期,尽管手术、放化疗技术对该病的有效率已达70%,但大多数病人仍在短期内复发,5年存活率不到30%。基因治疗是向肿瘤细胞引入抑癌基因或促进凋亡基因,以纠正或补偿基因缺陷从而达到治疗目的,并使治疗基因在肿瘤细胞内暂时或永久表达,导致肿瘤细胞凋亡或坏死,从而达到杀伤或抑制肿瘤细胞生长的目的。基因治疗的程序包括治疗目的基因的获得、靶细胞的选择与培养、载体的选择、将目的基因导入靶细胞、转导细胞的选择和鉴定以及基因治疗的安全性监测及疗效评价等。　　 Bcl-2基因即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因,是一种原癌基因,它具有抑制凋亡的作用,目前已经发现了一系列与Bcl-2同源的蛋白,构成Bcl-2基因家族,按功能分为两类,一类是像Bcl-2一样具有抑制凋亡的作用,另一类是具有促进凋亡的作用,其中以Bax研究最为广泛,Bax具有强大的促进细胞凋亡作用的基因,如果能够实现肿瘤细胞Bax基因的高表达,将促进肿瘤细胞的凋亡。故推测应用基因重组技术构建Bax基因表达质粒,并将重组质粒转入卵巢癌细胞内提高Bax基因在细胞内的表达可诱导细胞凋亡。　　 研究目的：　　 检测Bax基因对体外培养的人卵巢癌细胞系Ovcar3的促凋亡作用。　　 研究方法：　　 采用基因重组技术构建Bax基因表达质粒,经DNA测序鉴定并证实其序列正确。并构建Bax基因表达载体(PCDNA3-Bax),将实验分为空白对照组、PCDNA3组、PCDNA3-Bax组。利用脂质体转染法将2种载体转染人卵巢癌细胞系Ovcar3。应用蛋白印迹法(Westernblot)、反转录PCR、流式细胞术、MTT检测转染后各组细胞中活性Caspase-3蛋白的表达情况、Bax基因表达水平、细胞的凋亡率、细胞存活率。　　 研究结果：　　 1、成功构建表达Bax基因的载体PCDNA3-Bax。　　 2、Bax基因促进人卵巢癌细胞系Ovcar3凋亡。Westernblot检测显示PCDNA3-Bax组Caspase-3表达增高,PCR检测显示PCDNA3-Bax组Bax表达水平升高,流式细胞检测显示PCDNA3-Bax组细胞凋亡率升高,MTT结果显示PCDNA3-Bax组细胞存活率低。　　 研究结论：　　 1、成功构建表达Bax基因的载体PCDNA3-Bax。　　 2、Bax促进人卵巢癌细胞系Ovcar3凋亡。