鞘内注射JWH-015抑制炎性介质介导的NR2B活化对神经病理性疼痛的影响

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目的:我们将研究CB2受体激动剂JWH-015能否抑制CCI引起的神经病理疼痛。同时,我们观察CB2受体和NR2B在DRG,脊髓背角中激活的时间过程,CB2受体激动剂JWH-015和抑制剂AM630对大鼠热痛阈的影响及对DRG和脊髓NR2B的变化。方法:将大鼠造出坐骨神经结扎(CCI)模型,然后在将大鼠分别鞘内置管成功后,将48只成熟雄性SD大鼠随机分为4组,假手术组(sham组),仅暴露坐骨神经;CCI组,将大鼠坐骨神经结扎,仅注射DMSO液体,10μg/天,持续7天;F组,CCI后鞘内注射CB2激动剂JWH-015,10μg/天,持续7天;P组,CCI后在注射JWH-015前半小时注射CB2受体抑制剂AM630。在术后3天、7天、14天分别测定大鼠的热痛阈,并用免疫组化和western blot测定NB2B及炎性因子的表达情况。结果:1:与假手术组相比较,CCI组术后各时间点热痛阈显著下降(p<0.05),F组与CCI组相比,CCI组术后各时间点热痛阈热痛阈显著增高(p<0.05)。然而在P组中,预先注射CB2受体拮抗剂AM630后给予CB2受体激动剂后,各组大鼠搁时间点的热痛阈值较假手术组无明显变化,这表明预先鞘内注射AM-630后,CB2受体激动剂JWH-015的效应失效。2:CCI对大鼠脊髓背角中TNF-α和IL-1β的影响:坐骨神经结扎后脊髓背角TNF-α和IL-1β的表达明显增多,两种实验方法都说明了这一现象,免疫组化检测CCI后脊髓背角中TNF-α和IL-1β的表达与假手术组相比,CCI后各组大鼠TNF-α和IL-1β的表达明显增加(P<0.05),Western blot结果同样显示CCI后脊髓TNF-α和IL-1β表达明显增多。然而在CCI模型后鞘内注射JWH-015,能够抑制CCI模型后TNF-α和IL-1β的表达,且这种效应在预注射AM630后失效。3:CCI对大鼠脊髓背角中NR2B的影响:坐骨神经结扎后脊髓背角NR2B的表达明显增多,Western blot检测CCI后脊髓背角中NR2B的表达与假手术组相比,CCI后各组大鼠NR2B的表达明显增加(P<0.05),然而在CCI模型后鞘内注射JWH-015,能够抑制CCI模型后NR2B的表达,且这种效应在预注射AM630后失效。结论:1.CCI后大鼠脊髓TNF-α、IL-1β和NR2B较假手术组明显升高,炎性反应明显增强,TNF-α、IL-1β和NR2B都参与了神经病理性疼痛。2.鞘内注射JWH-015能有效减轻CCI模型后所引起的神经病理性疼痛,鞘内注射JWH-015的大鼠DRG和脊髓TNF-α、IL-1β和NR2B明显下降。3.预先鞘内注射AM-630后,JWH-015的效应失效。4.JWH-015是通过抑制炎性介质介导的NR2B活化从而进一步抑制CCI模型后所导致的神经病理性疼痛。
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