香烟烟雾对哮喘大鼠气道CCR7表达的影响及百令胶囊的干预作用

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目的:通过研究百令胶囊对香烟烟雾暴露哮喘模型大鼠气道CCR7蛋白表达水平及其对Th1/Th2平衡的影响,探讨香烟烟雾恶化哮喘及百令胶囊治疗哮喘气道炎症的免疫学机制,进而为临床上治疗哮喘患者提出实验理论依据。方法:健康雄性SD大鼠40只,随机分为空白对照组(A)、哮喘组(B)、吸烟哮喘组(C)、百令胶囊哮喘组(D)、百令胶囊吸烟哮喘组(E),每组8只。后四组分别于第1天、8天以10%卵白蛋白(OVA)致敏液腹腔注射致敏,第15天以2%OVA溶液60mL雾化吸入激发,1次/天,每次30分钟,每周6次,共8周,制备哮喘模型。从激发开始,将吸烟哮喘组及百令胶囊吸烟哮喘组大鼠置于自制熏烟玻璃箱内(60 cm×60 cm×50 cm)被动吸烟,10支/天,共60分钟,共吸烟8周。百令胶囊哮喘组和百令胶囊吸烟哮喘组从激发起,每次激发前30min百令胶囊灌胃给药,给药剂量为0.945g/kg。对照组以生理盐水2 ml代替卵白蛋白腹腔注射,第15天以生理盐60 ml代替卵白蛋白雾化吸入,其余饲养条件相同。于末次雾化激发吸入后24小时内,腹腔注入水合氯醛进行麻醉,处死大鼠,取完整肺组织,常规石蜡包埋、切片。采用免疫组织化学法检测各组大鼠气道CCR7蛋白的表达,同时采用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血清IFN-γ、IL-4水平。结果:1.B组(0.357±0.046)和C组(0.433±0.053)CCR7蛋白表达水平明显高于A组(0.123±0.027),差异具有统计学意义(均P<0.05);C组高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);D组(0.238±0.054)低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);E组(0.300±0.046)低于C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.B组(52.83±13.28)和C组(31.29±7.76)血清IFN-γ水平明显低于A组(134.27±17.67),差异具有统计学意义(均P<0.05);C组低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);D组(96.45±12.25)高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);E组(67.12±9.10)高于C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.B组(62.77±9.28)和C组(83.26±10.21)血清IL-4水平明显高于A组(32.14±8.95),差异具有统计学意义(均P<0.05);C组高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);D组(42.25±8.75)低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);E组(52.65±10.90)低于C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.CCR7可能参与了哮喘大鼠气道炎症反应。2.香烟烟雾可使气道CCR7表达增多,影响Th1/Th2平衡,加重气道炎症。3.百令胶囊可通过减少CCR7表达,调控Th1/Th2偏移,减轻气道炎症。4.临床上哮喘患者常规治疗基础上联合使用免疫调节药物,可能提高临床疗效。
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