论文部分内容阅读
前列腺素(Prostaglandins, PGs)是哺乳动物体内广泛存在的一种局部激素,其合成与受体表达影响到哺乳动物生殖生理的各个环节,包括:排卵、着床、分娩、黄体溶解等。奶牛输卵管中影响生殖的主要是前列腺素E2(Prostaglandins E2, PGE2)和前列腺素F2a (Prostaglandins F2α、PGF2α),其对输卵管内容物的输送、精子和卵子的结合以及早期胚胎发育均有着重要的生理作用。本研究以奶牛输卵管平滑肌为研究对象,探讨了雌激素(17p-estrogen, E2),对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α合成及其受体表达的调控作用,具体研究内容如下:1、雌激素对PGE2和PGF2a合成酶表达的调控体外培养奶牛输卵管平滑肌组织,采用实时荧光定量PCR法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2a合成酶mRNA表达的调控作用,采用Western Blot法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2a合成酶蛋白表达的调控作用,结果显示,COX-1、COX-2、mPGES-1、PGFS mRNA表达水平在雌激素诱导下均以浓度和时间依赖的方式增高,其蛋白表达变化在时效上与mRNA表达变化相一致。mPGES-2、cPGES mRNA和蛋白表达水平在时间和浓度上都不受E2调控。加入雌激素阻断剂后,COX-1、COX-2、mPGES-1、PGFS mRNA表达水平与E2作用后相比均下降,且与空白对照组表达水平一致。2、雌激素对PGE2和PGF2a受体表达的调控体外培养奶牛输卵管平滑肌组织,采用实时荧光定量PCR法检测奶牛输卵管平滑肌存在的PGE2和PGF2a受体种类,以及雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2a受体mRNA表达的调控作用,采用Western Blot法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2a蛋受体白表达的调控作用,结果显示,EP2、EP4和FP受体mRNA和蛋白表达水平在雌激素诱导下均以浓度和时间依赖的方式增高,且mRNA和蛋白表达在浓度和时间增高的趋势相一致。加入氟维斯群和他莫昔芬(选择性雌激素受体拮抗剂)后,EP2、EP4和FP受体mRNA表达水平与E2作用后相比均下降,且与空白对照组相比表达在同一水平。3、雌激素对体外培养奶牛输卵管平滑肌收缩作用的调控体外培养奶牛输卵管平滑肌组织,采用多道生理信息采集系统测定其收缩性及舒张性的变化。结果显示,雌激素作用后,E2能够使奶牛输卵管平滑肌更敏感于PGE2和PGF2α引起的收缩反应。结论:1、奶牛输卵管平滑肌COX-1, mPGES-1、PGFS的mRNA和蛋白表达受雌激素调控,且存在时间和浓度依赖性。2、奶牛输卵管平滑肌上存在EP2、EP4和FP受体,且其mRNA和蛋白的表达受雌激素调控,且存在时间和浓度依赖性。3、雌激素能够使奶牛输卵管平滑肌更敏感于PGE2引起的舒张反应和PGF2a引起的收缩反应。