仲景和清消补法抗免疫性肝损伤的理论探讨和实验研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:shijunjie88
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病毒性肝炎是由多种嗜肝性病毒引起的一种以肝脏损害为主的全身性急性或慢性传染病,目前可分为甲型、乙型、丙型、丁型、戊型、己型、庚型等七种类型,最近又发现了一种TTV所致的肝炎。据有关资料统计表明,我国一般人群甲型病毒性肝炎流行率平均为80.9%,乙型病毒性肝炎标志流行率为57.6%,丙型病毒性肝炎抗体流行率为3.2%,丁型病毒性肝炎流行率为1.2%,戊型病毒性肝炎抗体流行率为18.0%。其病程长、危害大、治疗难、易向慢性转化。慢性肝炎,尤其是慢性活动性肝炎易向肝硬化、肝癌转化,严重影响人类健康。而免疫损害机制在病毒性肝炎发病和慢性化过程中起到主要作用。从免疫角度探索有效的抗肝损害的药物,对于病毒性肝炎的预防、治疗以及慢性化的逆转具有重大意义。西医药对病毒性肝炎的研究近些年来发展迅速,治疗药物以干扰素效果最佳,其对慢性乙型肝炎、丁型肝炎、丙型肝炎的平均有效率分别为45%、30%、50%,但由于各种类型干扰素的昂贵价格及不良反应,限制了其在临床上的推广应用。辨证论治是中医药的特色之一,而祛邪扶正也成为中医药治疗病毒性肝炎的重要准则。大量的临床实践证明,中医药具有治疗确切,资料丰富,价格低廉,毒副作用小等优点,在治疗各类型病毒性急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化等疾病具有自身优势。小柴胡汤、茵陈蒿汤、大黄蟅虫丸、黄芪建中汤四方均出自张仲景《伤寒论》和《金匮要略》,是一系列临床疗效奇佳的经方。现代对其研究也颇为全面和深入,它们广泛用于治疗各种肝胆系统疾病。本课题从这四方和、清、消、补的治法出发,配合仲景肝病传脾的见解,各取小柴胡汤、茵陈蒿汤、大黄蟅虫丸、黄芪建中汤中主要药物,组成一首融仲景四法于一方的合法方剂。本合法方为名医验方,具有所清利湿热、疏肝健脾、活血软坚之功,符合病毒性肝炎湿热内蕴,络脉瘀阻,肝郁脾虚的病因病机。本研究对发展经方在防治疑难杂病的应用,探讨如何将经方扩展主治,古为今用具有一定的指导和参考价值。本论文主要分为文献综述、理论研究和实验研究三部分。1.文献综述:较为系统全面地总结了中医治法的研究概况,并对近十几年来免疫性肝损伤的模型研究及现代作用机理进行了总结评述。2.理论研究:主要从仲景和清消补治法出发,对仲景合法应用的形式、规则及其思路进行了分析,并探讨了仲景和清消补四法合方对慢性肝炎的意义。具体内容分为四部分:一为仲景和、清、消、补治法的论述及见解,二为仲景合法应用形式,三为合法应用规则及思路,四为仲景和、消、清、补合用对慢性肝炎的意义。3.实验研究:本实验研究采用卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)尾静脉联合注射制造免疫性肝损伤模型,通过仲景和消清补合法方进行治疗,该合法方设大、中、小三个剂量,并用联苯双酯作为阳性对照。从第一天注射BCG至第十二天注射LPS过程中,一直连续用药,LPS注射后24小时,进行以下指标的检测:应用光镜观察免疫性肝损伤病理组织改变;血清生化检测肝功能(ALT、AST);应用TAB法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);MTT比色法检测T、B淋巴细胞增殖能力;绵羊红细胞吞噬法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力;亚硝酸盐测定法测定NO诱生能力;生物活性法检测脾细胞产生Th1型细胞因子IFN-γ的能力,同时分离血清,用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4的含量。实验结果显示:正常组以上各项指标均正常,模型组各项指标检查明显出现异常,合法方大、小剂量治疗组、联苯双酯阳性对照组有不同程度的治疗作用,中剂量组效果显著,对不同指标作用效果不同。实验表明,仲景和清消补合法方各剂量组均有抗免疫性肝损伤<WP=5>的作用,其作用机理可归纳为下几个方面:(1)抑制脂质过氧化过程:主要通过降低脂质过氧化产物,如MDA的含量,从而减少毒物累积对肝脏的损害,同时提高SOD活性,增强清除过氧化产物的能力,脂质过氧化反应是免疫性肝损害的终末机制。(2)增强免疫功能:增强T、B淋巴细胞转化能力,间接增强其他各种淋巴细胞功能,增强体液免疫和细胞免疫,增强巨噬细胞吞噬能力。(3)增强NO生成能力,由于NO具有肝毒性和肝保护双重作用,本合法方能抑制肝损害时NO的减少,但对正常肝脏无影响。(4)调节Th1/Th2平衡:合法方降低损伤肝脏IFN-γ(Th1细胞因子)含量,也降低IL-4(Th2细胞因子)含量。本模型损伤肝脏IFN-γ、IL-4含量均升高,但IL-4升高较著,Th1/Th2平衡向Th2漂移,提示细胞免疫和体液免疫过分亢进,以体液免疫为重。本方降低IFN-γ、IL-4含量,且以IFN-γ降低为甚,说明本方抑制亢进的免疫功能,减弱免疫损害,使Th1/Th2平衡向Th1漂移回至正常。本方对正常肝组织无明显影响,提示其对免疫功能的调节作用。综上所述,仲景和清消补合法方具有抗免疫性肝损伤的作用,体现了中医扶正祛邪和整体调节的特色。我们推论,合法方中补法起到了增强免疫功能,提高SOD活性,属于扶正法则,和法调节Th1/Th2平衡,属于整体调节治则,而抑制脂质过氧化,清除病理产物,则属于祛邪法则范畴。但本研究对其作用机理仅做了初步的探讨,而其分子基因水平的详细机制,尚待?
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