基于NLRP3炎症小体及其下游因子探讨清热活血方在RA治疗中的抗炎机制

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目的通过观察清热活血方对类风湿关节炎大鼠一般形态学、病理改变的干预状况,并检测NLRP3炎症小体以及相关因子IL-1β和IL-18的表达的影响,探讨清热活血方在类风湿关节炎大鼠治疗中的抗炎机制。方法建立CIA大鼠动物模型。用清热活血方、金银花干预治疗,对比观察各组大鼠的整体状况、形态学变化情况及病理改变;采用ELISA方法检测大鼠血清中IL-1β和IL-18;采用RT-PCR检测大鼠滑膜组织和PBMC中NLRP3 mRNA表达水平;采用Western Blot方法对各组大鼠滑膜组织和PBMC中NLRP3蛋白表达水平对比分析。结果清热活血方能够改善CIA大鼠整体疾病状况,CIA大鼠关节的肿胀的情况得到有效地缓解;从病理上,清热活血方干预后,关节炎症水平和滑膜组织增殖得到有效控制,缓解了关节骨与软骨受损;细胞因子结果显示:与模型组大鼠相比,清热活血方组血清中IL-18和IL-1β含量均降低(P<0.01、P<0.05);NLRP3 mRNA检测结果显示:滑膜组织和PBMC中,清热活血方组和金银花组与模型组大鼠相比较NLRP3mRNA表达水平均降低(P<0.05);NLRP3蛋白检测结果显示:与模型组大鼠滑膜组织相比较,清热活血方组和金银花组NLRP3蛋白表达水平均降低(P<0.001)。与模型组大鼠PBMC相比较,清热活血方组NLRP3蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组大鼠相比较,金银花组NLRP3蛋白表达水平降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论1.CIA大鼠的NLRP3及其下游因子IL-1β和IL-18表达水平较高,提示NLRP3及其下游因子在RA的发生发展中起重要作用。2.清热活血方可抑制滑膜组织和PBMC中NLRP3表达,降低下游IL-1β和IL-18含量而发挥抗炎作用,NLRP3炎症小体有望成为RA治疗的新靶点。
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