【摘 要】
：
该研究以国内分离的一株O型FMD流行毒株作为研究对象,参考GenBank中已发表的基因序列,设计和合成了一对含有BamHI和XhoI酶切位点以及ATG起始密码子的引物,通过RT-PCR扩增出VP
论文部分内容阅读
该研究以国内分离的一株O型FMD流行毒株作为研究对象,参考GenBank中已发表的基因序列,设计和合成了一对含有BamHI和XhoI酶切位点以及ATG起始密码子的引物,通过RT-PCR扩增出VP1基因,连接到pGEM-T Easy载体中进行序列测定,应用分析软件对不同地区VP1基因进行序列比较和分析,结果表明本毒株与O/HKN/99株同源性极高,达96%.根据获得的FMDV VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成了免疫串联片段F,F全长213bp,编码65个氨基酸,含有VP1基因的主要抗原位点141~160及200~213位的氨基酸序列.同时为了克隆方便,在F片段的两端加入了HindⅢ和BamHI酶切位点,F片段由上海生工生物技术有限公司合成,以重组质粒pMD-F形式保存.用BamHI和XhoI双酶切pGEM-VP1后,将VP1片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-VP1;同时用HindⅢ和BamHI双酶切pMD-F,将F片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-F.大量提取、纯化质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F,与常规O型FMD灭活疫苗分别免疫6~8w龄的BALB/c小鼠和豚鼠,同时设生理盐水阴性对照组.基因疫苗接种前3d每只鼠左后腿肌肉注射盐酸普鲁卡因预处理.该实验成功构建了FMDV的结构蛋白VP1基因的真核表达载体pcDNA-VP1和含有VP1基因的主要抗原位点的真核表达载体pcDNA-F,能够在Vero细胞中进行瞬时表达.用DNA疫苗质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F免疫BALB/c小鼠和豚鼠,能够诱导细胞免疫和体液免疫反应,pcDNA-F可使豚鼠产生一定程度的保护性中和抗体,为进一步研制FMD基因疫苗奠定了基础.
其他文献
近年来，随着现代化教育手段的迅速普及，现代化课程建设已经迈向了一个全面开放的崭新领域。教师运用多媒体对文字、图象、声音以及动画、影视等的综合处理，达到了声、图、文并茂的情景教学效果；通过对时间、空间的多维创新，使抽象深奥的问题直观形象化。能有效地减轻学生课业负担、激发学习兴趣和学习的积极性，使学生“乐学”落到实处，提高了课堂教学效率。 一、优化教学情境，激发学习兴趣。 不同的教学内容应创设不同
摘要：创新思维能力，是指创造性思考问题，解决问题的能力，是智力活动中的最高表现。长期以来，受传统教学观念的影响，在片面追求升学率的巨大压力下，语文课堂教学对培养创造性思维没有足够重视，在教学中一味地要求学生按照教师预先设计好的思维模式和思维轨道思考问题，而对学生独出心裁，大胆质疑，教师却不予理会，甚至训斥挖苦。长此以往，培养出的学生附和随从，墨守陈规，缺乏独立思考，锐意求新的意识，学习效果也不尽人
天然免疫系统通过表达不同的模式识别受体(pattern recognition receptors, PRRs)特异性地识别入侵的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs),发
摘要：语文阅读教学是初中语文教学中的重要组成部分，一名语文成绩好的同学，其语文阅读能力一般不差。教师应当根据初中生的发展特点，有针对性地进行语文阅读教学。笔者结合多年的教学经验，从当前语文阅读教学中存在的问题出发，有效地提出几点关于初中语文阅读教学的策略。 关键词：初中语文 阅读教学 有效性 策略 语文阅读教学在初中语文教学中占有重要的地位，新课标提出：初中语文教师应从新的视角，审视阅读课的教
作为一个语文教师，在平时的作文教学中，我最大的感受就是通过写生活随笔，引导学生走进生活，寻找生活中感兴趣、有意义的人和事，这样才能让学生的作文充满生活的气息，富有时代的动感，才能让他们的作文以一种独特的面貌，与众不同的品质吸引所有的读者。 生活是一个浩瀚的大海，博大宽广，时时处处都有我们独特的感受，孩子的生活阅历尽管很简单，但储存在他们记忆里的东西一定很多。应该说作文是生活的一面镜子，呈现的是活
摘要：在高中歷史课堂教学中实施愉快教学是目前我们落实新课程改革探索的新教学方法之一。本人愿意把教学中运用愉快教学法的心得写出来，求教于同行，以期达到抛砖引玉之目的。 关键词：高中历史 愉快教学 一、营造民主的学习氛围 1、必须清醒的认识到历史课堂教学的接受式模式面临着严峻的时代挑战。一个照本宣科的教师当然是最差劲的教师。“不激发学生的学习热情而想要硬塞的教师，不过是在锤打冰冷的铁。”美国学者
摘要：作为一名小学数学教师，要想全面提高教育教学质量，就要掌握这些新理念，依据新的数学课程标准有目的地引导学生进行数学教学活动，从学生已有的生活经验出发，重视培养学生的创新意识和实践能力。现就新课程下的小学数学教学谈谈我的观点与做法： 关键词：小学数学 创新 能力 一、把学习数学变成具体的感受和体验 小学数学是数学教育的基础，是孩子们一生中学习数学的开始。如何在孩子们面前展示出一个五彩缤纷、
【背景分析】 “乘法的初步认识”是人教版二年级上册的教学内容。这是一节乘法概念的起始课，概念新、内容多，而乘法意义的认识既是本节课中的教学重点，也是学生学习的难点。
摘要：在自主探究学习中，教师要注重创设情境，激发学生自主探索欲望，教给学生探究方法，引领学生探究，多角度评价学生学习，充分发挥主导作用，才能真正提高学习质量。 关键词：自主探究 创设情境 引领探究 多角度评价 新课程标准指出，自主探索、合作交流、动手操作是学生学习的重要方法，同时也体现了学生的主体地位。但教师把课堂还给了学生，其主导作用是不是削弱了？这是很多教师的顾虑。我国著名教育家叶圣陶先生
摘要：随着新课程改革的深入，如何更好地培养学生运用数学知识解决实际问题的能力显得越来越重要，所以应用题的教学不容忽视。作为数学教师，应依据学科教学的特点，在思想上高度重视，在行动上精心安排，认真落实优化应用题教学，始终着眼于学生应用意识和能力的提高，应用题将促进素质教育，学生素质也將会在应用题教学中得到显著提高。本文结合笔者多年的教学经验探讨了初中数学应用题教学的策略问题。 关键词：初中数学 课