论文部分内容阅读
目的：采用改良Allen’s打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,评价英夫利昔单抗、甲基强的松龙及二者联合对损伤节段脊髓组织NF-κB (nuclear factor Kappa B)、TRADD(Tumor necrosis factor receptor associated death domain)和FADD(Fas associated death domain)表达的影响。探讨英夫利昔单抗联合甲基强的松龙对急性脊髓损伤的治疗效果及发生机制。材料和资料：正常成年雄性SD大鼠90只,随机分为6组：(1)正常对照组(Group NC, n=15), (2)假手术组(Group SO, n=15),(3)安慰剂治疗组(Group NS, n=15), (4)甲基强的松龙治疗组(Group MP, n=15), (5)英夫利昔单抗治疗组(GroupIN, n=15), (6)英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组(Group I+M, n=15)。除假手术组仅做椎板切除不予打击、治疗处理和正常对照组外,其余实验组均采用改良Allen’s打击法制作T1o水平的急性脊髓损伤模型并于脊髓损伤即刻给予相应的药物治疗(甲基强的松龙30mg/kg腹腔注射,英夫利昔单抗5mg/kg腹腔注射,安慰剂所用剂量与其他药物治疗组所用溶剂的剂量相等腹腔注射)。动物模型建立成功后,每组取5只大鼠观察其脊髓功能的行为学BBB评分(观察21天)；其余动物均于脊髓损伤后第24h取材,每组取5只大鼠脊髓标本进行免疫组织化学染色,观察并比较各组脊髓标本NF-κB、TRADD和FADD的表达情况；同时,每组再取5只大鼠脊髓标本使用液氮保存,进行RT-PCR反应,观察并比较各组脊髓标本NF-κB mRNA、TRADD mRNA和FADD mRNA的表达情况。结果：(1)BBB评分：急性脊髓损伤模型建立成功后,模型组大鼠的BBB评分迅速下降,随后随时间的延长又逐渐上升。在伤后第14和21天,英夫利昔单抗治疗组、甲基强的松龙治疗组和英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠的BBB评分均高于安慰剂治疗组(p<0.05),同时,英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠的BBB评分又高于单独使用英夫利昔单抗和甲基强的松龙治疗组(p<0.05)。(2)免疫组织化学结果：在急性脊髓损伤后第24小时,英夫利昔单抗治疗组、甲基强的松龙治疗组及英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠脊髓标本NF-κB、TRADD和FADD表达阳性的细胞数均少于安慰剂治疗组(p<0.05),且英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠脊髓标本NF-κB、TRADD和FADD表达阳性的细胞数又少于单独使用甲基强的松龙和英夫利昔单治疗组(p<0.05)。(3) RT-PCR结果：在急性脊髓损伤后第24小时,英夫利昔单抗治疗组、甲基强的松龙治疗组及英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠脊髓标本NF-κB mRNA、TRADD mRNA和FADD mRNA的表达水平均低于安慰剂治疗组(p<0.05)；且英夫利昔单抗联合甲基强的松龙治疗组大鼠脊髓标本NF-κB mRNA、TRADD mRNA和FADD mRNA的表达水平又低于单独使用甲基强的松龙和英夫利昔单抗治疗组(p<0.05)。结论：(1)英夫利昔单抗、甲基强的松龙均可通过降低NF-κB、TRADD和FADD的表达,减轻脊髓继发性损伤和促进脊髓损伤后神经功能障碍恢复。(2)英夫利昔单抗和甲基强的松龙在抑制NF-κB、TRADD和FADD的表达方面有较好地协同作用,二者联用比各自单独使用具有更好地治疗脊髓损伤的疗效。