乙型肝炎病毒前C区及BCP区变异与临床关系的研究

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目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异、基本核心启动子(BCP)区A1762T/G1764A变异及联合变异(G1896A与A1762T/G1764A同时变异)在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者中的变异特点,分析HBeAg阴性CHB患者前C区G1896A变异、BCP区A1762T/G1764A变异及联合变异与病情进展的关系以及CHB患者前C区及BCP区变异与细胞因子的关系。方法收集120例HBVDNA(+)CHB患者及60例健康对照者血清标本,将其分为三组:A组为HBeAg阴性CHB患者60例(轻度19例,中度29例,重度12例);B组为HBeAg阳性CHB患者60例(轻度22例,中度28例,重度10例);C组为健康对照者60例。用荧光定量PCR法检测A、B两组HBVDNA水平,用直接测序法检测A、B两组前C区G1896A及BCP区A1762T/G1764A变异的发生率,根据前C区及BCP区测序结果又分为变异组和无变异组,分析前C区及BCP区变异发生与病情进展的关系。双抗夹心酶联免疫吸附试验检测变异组、无变异组和正常对照组细胞因子IFN-γ、IL-10的水平,分析前C区及BCP区变异与细胞因子的关系。结果120例HBVDNA(+)CHB患者中A组检出变异株48例,B组检出变异株24例,A组和B组CHB患者中G1896A变异检出率分别为38.3 %(23/60)和16.7% (10/60)(х2=7.06, P =0.008);A1762T/G1764A变异的检出率分别为16.7%(10/60)和23.3%(14/60)(х2=0.83, P =0.361);联合变异的检出率分别为25%(15/60)和0%(0/60)(х2=17.14, P =0.000)。60例HBeAg阴性CHB患者中G1896A、A1762/G1764A、联合变异的变异组HBVDNA含量分别为(5.87±0.85)lgcopies/ml、(5.84±0.82)lgcopies/ml、(5.95±0.50)lgcopies/m均明显高于无变异组HBVDNA含量,分别为(4.50±0.71)lgcopies/ml、(4.46±0.69)lgcopies/ml、(4.75±0.94)lgcopies/ml ,t值分别为t=7.58、t=7.94、t=4.42,P均<0.05,差异有统计学意义。HBeAg阴性CHB患者轻、中、重度不同病情中,G1896A变异、A1762T/G1764A变异及联合变异的变异组与无变异组比较,平均秩及P值分别为(34.25,24.02;P=0.018);(37.40,25.57;P=0.005);(40.37,27.21;P=0.006),差别有统计学意义(P <0.05)。变异组血清IFN-γ水平为(102.33±27.20)pg/ml明显高于无变异组(79.18±16.43)pg/ml及正常对照组(35.77±4.23)pg/ml,P均<0.01,差异有统计学意义。变异组血清IL-10水平为(28.13±7.00)pg/ml明显高于无变异组(13.91±5.42)pg/ml及正常对照组(13.68±2.27)pg/ml,P均<0.01,差异有统计学意义。结论(1)HBV前C区G1896A变异和联合变异是导致HBeAg阴性,HBVDNA持续阳性的主要机制之一。(2) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G1764A变异可能加重HBeAg阴性CHB患者病情的发展。(3) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762/G1764A变异后可能导致IFN-γ、IL-10水平升高。
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