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目前,许多抗癌药物和传统农药为疏水性药物,导致了其利用率低和靶向性差的不足,进而限制了癌症治疗和农业领域的发展。纳米药物载体由于其高生物相容性,高载药率,易控制药物释放等,可以有效解决这一难题。作为一种新型的药物输送系统,纳米药物载体在癌症治疗和农药输送中起着决定性作用。因此,基于纳米药物载体PSIOAm的自身优势,建立负载抗癌药物或农药的高灵敏分析方案和多功能应用是非常重要的。本论文以高分子纳米药物载体油胺功能化聚琥珀酰亚胺(PSIOAm)作为药物负载系统,首先制备了高分子纳米药物载体PSIOAm及其全抗原,并获得了实验室制备的高效价的抗PSIOAm抗体。基于此,药物载体PSIOAm可以不仅负载抗癌药物,还可以负载农药。利用抗原抗体反应的高特异性,建立对纳米药物载体负载抗癌药物的荧光免疫分析;利用PSIOAm可以负载农药的优势,扩展纳米药物载体的多功能应用。这为纳米药物载体负载药物的定量检测和性能研究提供了更广泛的应用价值。具体工作如下:1.纳米药物载体PSIOAm及抗原抗体的制备与表征首先成功制备了纳米药物载体PSIOAm半抗原和全抗原,并获得了高效价的抗PSIOAm抗体,对PSIOAm半抗原和全抗原进行表征,并对PSIOAm抗血清效价进行测定,抗体效价好,满足后续免疫分析测定,为后续工作纳米药物载体PSIOAm负载抗癌药物喜树碱和负载农药阿维菌素提供了重要基础。2.一种可与载药纳米载体抗原反应的独特抗体应用于负载喜树碱的纳米药物载体荧光免疫分析Ag/Ab反应的本质之一是一群抗体分子仅与一种抗原反应的能力。本章发现了一种独特的抗体,既可以与无载药的药物纳米载体结合,也可以与载药的药物纳米载体发生抗原抗体反应,从而实现从0载药到载药的突破。本工作将这一独特抗体特性应用于高灵敏检测喜树碱负载纳米药物载体。首先制备pH响应型纳米药物载体PSIOAm作为免疫原,以获得高效价的抗PSIOAm抗体。当抗癌药物喜树碱(CPT)负载PSIOAm(称为CPT@PSIOAm)时,抗PSIOAm抗体不仅可以与PSIOAm高度特异性结合,而且还可以在免疫反应中捕获CPT@PSIOAm。抗PSIOAm抗体成为从无载药到载药系统的桥梁,利用FITC作为荧光标记物用于标记抗体,建立了CPT@PSIOAm的直接竞争荧光免疫测定法。在最佳条件下,荧光免疫分析法对CPT@PSIOAm定量检测的线性范围为0.12~1.6×103ng/m L(R2=0.991),检测限为0.04ng/mL。回收率91%到104%令人满意,这表明引入这种独特的抗体为检测纳米抗癌药物喜树碱提供了一种更加可行的方法。3.一种荧光共振能量转移FRET荧光探针用于高灵敏定量检测负载喜树碱的纳米药物载体为了进一步提高荧光免疫分析方法的灵敏度,本工作建立了哌嗪-罗丹明B(RhB)荧光共振能量转移(FRET)探针应用于高灵敏定量检测CPT@PSIOAm的免疫分析方法。一种无毒的刚性哌嗪荧光染料作为FRET供体,RhB作为受体,二者之间能够发生FRET,拓宽了罗丹明B的激发范围。对哌嗪-RhB FRET荧光探针进行条件优化,有效提高了探针的荧光强度。最终建立了哌嗪-RhB FRET荧光免疫分析高灵敏定量检测CPT@PSIOAm,并对免疫分析条件优化,得到最佳抗原浓度为25μg/m L,抗体浓度为30μg/mL,最佳反应时间为2h,封闭剂浓度为1%,PBS液优化得到0.005mol/L,pH 7.0。在优化五个条件下,建立了竞争型标准曲线,线性方程F=23066-3689.7logc,相关系数R2=0.993,在浓度为0.027-698.1ng/mL范围内有良好响应。测定结果显示最低检测限(IC10)为5pg/mL,检测灵敏度IC50为4.39pg/m L。通过加标回收测定回收率为96.3-107%。结果表明,哌嗪-RhB FRET荧光免疫分析实现了对CPT@PSIOAm的高灵敏检测,与FITC分析相比,具有更低检测限(5.0pg/mL)。该方法有效克服了FITC见光易分解,荧光强度低、发射波长范围窄的缺点。4.快速纳米沉淀法制备负载阿维菌素的纳米药物载体PSIOAm实现可控尺寸、粒径均匀和增强叶面吸附常规农药由于低利用率和对植物叶子弱的亲和力,导致了对环境和食品的严重污染。然而,由于纳米材料制备比较复杂和繁琐,纳米材料的制备在形貌,粒度均匀性和粒子可控性方面仍然面临诸多问题。特别是对于特定功能的纳米农药,它的形貌、粒子大小和粒径均匀性对其在叶子表面的吸附和农药的输送等起着非常重要的影响。本工作中,为了解决上述问题,本章选择绿色、可生物降解的油胺功能化聚琥珀酰亚胺(PSIOAm)作为农药负载系统,通过快速纳米沉淀法制备了粒径均匀,尺寸可控的负载阿维菌素(AVM)的PSIOAm纳米粒子(AVM@PSIOAm)。AVM@PSIOAm纳米粒子的平均粒径为100nm左右,具有以下优点:简单快速、粒径均匀、有效控制农药释放、稳定性好和药物包封率高等。与市售的阿维菌素乳液相比,AVM@PSIOAm在玉米叶上表现出优异的吸附性能,并且很大程度依赖于纳米粒子表面的官能团。总之,AVM@PSIOAm纳米粒子为农业领域提供一种可规模化生产的纳米农药制剂,在未来农业中展现出诱人的应用前景。