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目的:通过研究榄香烯联合细胞毒性药物奈达铂、氟尿嘧啶对人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的增殖、凋亡、分裂周期的影响及PD-L1和PTEN/PI3K/AKT通路相关蛋白的变化,探讨榄香烯作用于人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的机制,为临床应用提供理论依据。材料与方法:1.应用CCK-8法检测和计算榄香烯、奈达铂、氟尿嘧啶的半数抑制浓度(IC50),检测联合用药对Ec109细胞株的抑制率。2.应用流式细胞仪检测榄香烯、奈达铂、氟尿嘧啶、榄香烯联合奈达铂、榄香烯联合氟尿嘧啶、奈达铂联合氟尿嘧啶、榄香烯联合奈达铂和氟尿嘧啶对Ec109细胞株凋亡、周期的影响;3.应用Western blot法检测各组药物作用后的Ec109细胞株PD-L1、PTEN、PI3K、AKT蛋白表达水平的变化。结果:1.榄香烯(浓度≥60ug/ml)、奈达铂、氟尿嘧啶对人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109抑制作用呈现时间与浓度的效应关系,差异有统计学意义(P<0.05)。药物作用于细胞48h的IC50分别为:榄香烯70.873ug/ml、奈达铂60.358 um/ml、氟尿嘧啶84.159 um/ml,后续实验均以榄香烯60ug/ml、奈达铂50um/ml、氟尿嘧啶50um/ml为浓度参数。榄香烯、奈达铂和氟尿嘧啶的两药联合较单药能更好地抑制细胞的增殖活力,榄香烯、奈达铂和氟尿嘧啶的三药联合较两药联合和单药能更好地抑制细胞的增殖活力,差异均有统计学意义(P<0.05)。2.低浓度(15ug/ml、30ug/ml)的榄香烯对Ec109细胞株具有增殖作用,差异有统计学意义(P<0.05),其活细胞吸光度OD值均较空白组高,差异有统计学意义(P<0.05)。3.榄香烯、奈达铂和氟尿嘧啶的两药联合较单药能提高细胞凋亡率,使细胞更多停滞在S及G2期,缩短G1期占比,差异有统计学意义(P<0.05)。榄香烯、奈达铂和氟尿嘧啶的三药联合较两药联合和单药能提高细胞凋亡率,使细胞更多停滞在S及G2期,缩短G1期占比,差异有统计学意义(P<0.05)。4.所有联合用药组及单药组Ec109细胞株的PTEN蛋白表达较空白对照组总体呈上升的趋势,差异有统计学意义(P<0.05);所有联合用药组及单药组Ec109细胞株的PD-L1、PI3K、AKT蛋白表达较空白对照组总体呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05);5.榄香烯联合奈达铂组、榄香烯联合氟尿嘧啶组较奈达铂、氟尿嘧啶单药组及其两药联合用药组Ec109细胞株的PTEN蛋白表达量减少,差异有统计学意义(P<0.05);所有联合用药组均较单药组PI3K/AKT蛋白表达量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。6.榄香联合奈达铂组、榄香烯联合氟尿嘧啶组、榄香烯联合奈达铂和氟尿嘧啶组较单药组Ec109细胞株的PD-L1蛋白表达量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.榄香烯(浓度≥60ug/ml)能抑制人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109增殖;低浓度(15ug/ml、30ug/ml)榄香烯能促进人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109增殖。2.榄香烯联合奈达铂和氟尿嘧啶较单药和两药联合应用可以提高人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的抑制率。3.榄香烯联合奈达铂和氟尿嘧啶较单药和两药联合应用可以提高人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的凋亡率以及S和G2期占比,缩短G1期占比。4榄香烯单药或联合奈达铂和氟尿嘧啶能抑制人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的增殖和促进凋亡,PTEN蛋白表达提高,PI3K和Akt蛋白表达降低,药物的作用机制可能与负向调控PTEN/PI3K/Akt/信号通路有关。5.榄香烯单药或联合奈达铂和氟尿嘧啶可使人高分化食管鳞状癌细胞株Ec109的PD-L1蛋白表达下调。提示减少PD-L1介导的免疫逃逸可能与药物在人体内作用机制有关。