目的:验证DAPT对具有干细胞特性的三阴性乳腺癌细胞系的抑制作用,并初步探究其作用机制。方法:体外培养三阴乳腺癌细胞株HCC38和HCC1806,通过ALDEFLUOR试剂盒分选出ALDH1阳性的细胞,按照所给予的药物不同,将细胞分成三组:空白对照组(加入生理盐水)、实验组(加入不同浓度DAPT)和阳性对照组(加入多西他赛)。1.利用ALDEFLUOR试剂盒,流式分选出ALDH阳性的HCC38细胞。2.通过微球体实验,验证HCC38细胞系中较高的肿瘤干细胞比例。3.MTT法检测抑制剂DAPT对处理后HCC38细胞体外增殖的抑制效应。4.应用流式细胞仪检测DAPT对细胞凋亡的影响。5.Western blot试验检测Notch信号通路下游关键蛋白Notch1表达水平。6.Transwell侵袭试验证明HCC38细胞的侵袭能力。7.接种HCC38或HCC1806于裸鼠,观察DAPT对裸鼠体内肿瘤的抑制作用结果:HCC38细胞在无血清培养下能够形成微球体(MSs),富含ALDH阳性细胞。与空白对照组相比,DAPT不仅能显著杀伤微球体,并且比阳性对照组(多西他赛)作用更明显。DAPT不仅能够抑制HCC38细胞的生长、诱导HCC38细胞凋亡,还可以降低HCC38细胞的侵袭力、抑制HCC38细胞的Notch1蛋白表达,DAPT在裸鼠体内的抑瘤作用明显,能够有效遏制肿瘤的生长。结论:Notch信号转导通路的抑制剂DAPT通过抑制Notch下游蛋白Notch1表达,可选择性的杀伤乳腺癌干细胞,以此为靶点,对治疗三阴性乳腺癌提供新的契机。