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茶皂素(Tea saponin),又称茶皂甙,茶皂苷,是一种结构类似的齐墩果烷型五环三萜类化合物的总称,广泛存在于茶科(Theaceae)植物的种子、花、果实、茎和根等部位。茶皂素具有优良的表面活性,可广泛应用于日化、洗护及建材等行业;同时它还具有抗渗消炎、抑菌抗病毒、降血压血脂、保护肠胃等生理功能,在医药和化妆品行业有巨大的应用潜力。当前提取茶皂素的主要原料是油茶籽提油后的副产物,对其中的茶皂素进行提取利用,具有重要的经济价值和环境价值。本文以水媒法制油后水相副产物为原料,利用超滤和大孔树脂法对其中的茶皂素进行提取纯化,并对纯化后茶皂素进行结构分析鉴定,最后对水解前后茶皂素产品的性质变化做对比研究。主要研究内容如下:1、采用超滤对水媒法提油后水相中茶皂素进行初步分离纯化。通过单因素实验,得到最佳超滤条件为:采用截留相对分子质量为10 k的改良纤维素复合膜(PLCGC),初始水相溶液稀释4倍,调节pH为7.0,后期恒容超滤,加3倍初始体积的水。茶皂素透过率可达64.39%,茶皂素纯度为84.16%。2、筛选出XR910X大孔树脂对超滤后的茶皂素进行了进一步纯化。动力学研究表明,XR910X树脂对茶皂素吸附符合Freundlich模型,优化后树脂纯化最佳工艺为:上样:样品pH 6.0,流速1.71 BV/h,体积1 BV;洗脱部分杂质:水,2 BV,0.075%(W/V)NaOH溶液,2 BV,流速1.71 BV/h;解吸:90%(V/V)乙醇溶液,流速1.71 BV/h,体积2 BV。上述条件下,茶皂素回收率为70.34%,纯度为94.26%。3、利用制备型高效液相色谱、高效液相串联质谱、红外光谱等手段对纯化后茶皂素单体进行结构分析。结果表明,纯化后茶皂素糖链中由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和半乳糖四种单糖组成;共鉴定出7种茶皂素单体,其相对分子质量主要集中在1000~1511之间。4、最后对水解前后的茶皂素产品性质的变化进行研究。结果发现,茶皂素有良好的表面活性,2.5 mg/mL的浓度就将水的表面张力从72.12 mN/m降至32.53 mN/m,而水解后则完全丧失了表面活性;茶皂素产品水解后总还原力和清除DPPH自由基的能力要优于水解前茶皂素,清除ABTS+能力两者相似,总体上水解后抗氧化能力增强;总体上茶皂素产品水解后的抑菌效果要弱于水解前,受试的四种微生物中,对酵母菌的抑制能力最强,其次是大肠杆菌和枯草芽孢杆菌,对黑曲霉完全没有抑菌性;茶皂素产品水解前的溶血性远远高于水解后,200μg/mL茶皂素的溶血率可达到83.92%,而水解后200μg/m L溶血性只有21.54%。水解反应主要破坏茶皂素产品中的糖链,以上充分说明,茶皂素结构中的糖链对其生理活性有非常重要的作用。一旦糖链被水解或者破坏,茶皂素活性也会发生改变。