单增李斯特菌是四大食源致病菌之一,感染单增李斯特菌后会对人体健康产生极大危害,主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多等。作为益生菌的乳酸菌能够产生包括细菌素在内的多种抑菌物质,其中Ⅱ类细菌素能够特异性抑制单增李斯特菌,且具有较高的安全性、稳定性。为了获得高效抑制单增李斯特菌的细菌素,并明确其特性,本研究对高产细菌素的乳酸菌进行了筛选,鉴定。对其产生的细菌素进行了分离、纯化,和特性评价,并通过质谱分析和全基因测序对细菌素的氨基酸序列进行基因组学分析,为高产细菌素乳酸菌的实际生产应用提供了理论支持。具体研究结果如下:（1）通过牛津杯双层琼脂法,从实验室保藏的481株乳酸菌中筛选出了 7株对单增李斯特菌有抑菌作用的乳酸菌。排除过氧化氢与有机酸干扰后经蛋白酶敏感试验确定有6株乳酸菌为产细菌素菌株。选用抑菌直径最大的270号菌株作为研究对象,结合菌株的形态特征、生理生化特性及16S rRNA序列,鉴定其为Lactobacillus plantarum,将其命名为LP270。（2）通过乳酸菌LP270的生长曲线的测定,发现细菌素LP270合成与菌体生长存在着对应关系,当菌体培养至对数末期时细菌素LP270合成达到最大值。采用细胞吸附-解吸附方法对1,500mL LP270发酵液进行了细菌素分离,所得细菌素粗提液蛋白总质量为126.6mg,比活力为6066.35AU/mg。细菌素粗提液经减压蒸发、酸性缓冲液透析纯化后得到蛋白质总量为3.33mg,比活力为76,876AU/mg。经过高效制备液相色谱纯化,最后共获得细菌素2.28mg,比活力达89825.56AU/mg。经过Tricine-SDS-PAGE电泳后,细菌素为单一条带,其分子量介于3.4-6.9KDa之间。将其命名为细菌素LP270。（3）通过热稳定性测试表明细菌素LP270具有良好的稳定性,经100℃高温处理20min后仍具有85%的抑菌活性。酸碱耐受试验表明细菌素L270具有较强的酸耐受性,在pH 2-7范围内能够保持其抑菌活性。蛋白酶水解结果表明其除了对胃蛋白酶有一定的抗性外,对胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及蛋白酶K具有敏感性。抑菌谱测定显示细菌素LP270除对李斯特菌具有抑菌活性,对其他测试菌株没有表现出抑菌活性。其中对单增李斯特菌的最小抑制浓度（MIC）达到了 1.78 μg/mL,杀菌动力学测定也显示细菌素LP270对单增李斯特菌具有较好的抑制效果。（4）经过全基因组测序发现乳酸菌LP270的基因组中包含1条染色体和2个质粒（P1,P2）,长度分别为 2,952,197bp,11,899bp,12,458bp,染色体 GC 含量为 44.93%。全基因组序列经antiSMASH细菌素预测网站分析后,发现质粒P1上存在细菌素的合成基因簇。该基因簇包括细菌素免疫基因、细菌素编码基因、ABC转运基因与细菌素转运辅助蛋白。该基因合成簇编码的成熟细菌素含44个氨基酸,序列中含有Ⅱ类细菌素的保守序列-YGNGV-,其分子量为4.6 KDa与Tricine-SDS-PAGE和质谱测定结果相吻合。这表明该菌株所产乳杆菌素及该途径相关蛋白因子均由质粒1编码产生。与Genebank中其余8株产细菌素的乳酸菌的eggNOG注释对比后我们发现LP270具有很强的碳水化合物利用能力。该菌株基因组中有204个编码基因与碳水化合物运输和代谢功能相关,120个基因与能量产生和转化有关。同时鉴定出48个可转运多种糖类物质的PTS转运系统相关基因。上述分析表明,LP270菌株具有较强的能量生产与转化能力,该特性有助于将其作为生产细菌素的工业菌株。同时基因组分析发现,LP270有很强的肠道适应能力,其含有2个胆汁水解酶,3个氯酰甘氨酸水解酶。此外,乳酸菌LP270对环境适应力也极强,含有12个pH耐受基因,12个温度耐受基因,5个渗透压调控基因和1个噬菌体应激蛋白PspC编码基因。这表明,该菌株有望成为良好的肠道益生菌。