背景:胰腺癌是一种恶性程度极高的消化系统肿瘤,吉西他滨是目前临床治疗胰腺癌的一线药物。但是由于肿瘤耐药的存在,胰腺癌的药物治疗效果欠佳。Rho鸟苷三磷酸酶(Rho GTPases)是一个20-30成员组成的超蛋白家族,在肿瘤的生物学活动中发挥着重要的作用,而Rho鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2(Rho GDP dissociation inhibitor RhoGDI2)是其关键的调控因子。现有的研究表明,RhoGDI2在胰腺癌细胞的迁移和侵袭中发挥了重要作用,并且与数种肿瘤细胞耐药有着密切关系。目的:本研究的目的为探讨RhoGDI2对胰腺癌细胞生物学行为的影响,探究RhoGDI2表达对胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的影响,分析发挥作用的相关机制。方法:1.应用免疫印迹法(Western blot)检测RhoGDI2在5株胰腺癌细胞株(PANC-1,PATU8988,CFPAC-1,SW1990,PL45)中的蛋白表达水平;2.应用小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)下调RhoGDI2的表达,过表达质粒分别在胰腺癌细胞株中上调RhoGDI2的表达,并用western blot验证细胞株的RhoGDI2蛋白表达水平,利用平板克隆形成实验、Cell Counting Kit-8(CCK-8)增殖实验检测细胞的增殖,划痕实验检测细胞的迁移,Transwell细胞体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力,Hoechst33342活细胞染色液检测细胞凋亡,活细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)活性检测试剂检测细胞凋亡途径,半抑制浓度(IC50)、CCK-8增殖实验、Hoechst33342活细胞染色液染色检测胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的变化。结果:在5株胰腺癌细胞株中,RhoGDI2蛋白在PATU8988胰腺癌细胞株中表达水平最高,在PL45胰腺癌细胞株中表达水平最低。通过Western blot检测RhoGDI2转染效率,对照组和干扰组、过表达组的RhoGDI2表达水平差异均有统计学意义。细胞功能实验提示RhoGDI2可以明显提高胰腺癌细胞的增殖能力和侵袭、转移能力。Hoechst33342活细胞染色液染色提示RhoGDI2可以促进胰腺癌细胞的凋亡,活细胞Caspase-3活性检测试剂染色验证RhoGDI2可以通过调控caspase-3来抑制胰腺癌细胞凋亡。IC50、CCK-8增殖实验、Hoechst33342活细胞染色液染色及活细胞Caspase-3活性检测试剂染色表明RhoGDI2可以降低胰腺癌细胞对于吉西他滨的敏感性。结论:1、RhoGDI2可以促进胰腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭,并可抑制胰腺癌细胞凋亡。2、RhoGDI2可以降低胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。3、RhoGDI2可能通过下调caspase-3的表达来抑制吉西他滨诱导的胰腺癌细胞凋亡。