研究背景与目的:弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)是成人中最常见的淋巴样恶性肿瘤。是一组由具有泡状核,突出的核仁,嗜碱性细胞质和高增殖率的大细胞组成的淋巴恶性肿瘤。自从由环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松组成的标准化疗方案被用于治疗DLBCL以来,完全缓解率达60%～70%。联合利妥昔单抗进一步提高了疗效,但仍有30%～40%左右的患者复发并最终死亡。在2004年,SENEX基因被成功克隆,被认为是一个和细胞衰老密切相关的基因,主要控制细胞的生长周期、衰老和凋亡。最早在2010年,有学者首次报道了关于SENEX基因通过调控内皮细胞中p16INK4a途径诱导细胞应力性早衰形成的研究。但其在DLBCL中的表达及作用目前尚未见相关报道。本研究拟探讨SENEX基因在DLBCL中的表达及其对DLBCL复发的影响及其可能的作用机制。方法:收集本院初诊、完全缓解、完全缓解后复发的DLBCL患者(各3例)的外周血;分别应用qRT-PCR和Western blot法检测3例初诊DLBCL患者(初诊组)、3例复发DLBCL患者(复发组)和3例完全缓解DLBCL患者(完全缓解组)的SENEX基因和蛋白的表达情况;应用SiRNA转染技术沉默DLBCL细胞株OCI-LY8中的SENEX基因;Western blot和qRT-PCR法验证其转染效率;CCK-8检测转染后细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清中游离与腺病毒E2启动子结合的转录因子(E2F)水平;Western blot检测细胞中p16和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)表达水平。结果:我们发现,与初诊组和完全缓解组相比,复发组ARHGAP18蛋白表达水平明显增高,与此结果一致的是,SENEX基因水平也升高。此外,外周血磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(phosphorylation retinoblastoma,pRb)水平在复发患者中升高,完全缓解患者中降低,视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma,Rb)表达水平则显示出相反的趋势。这些结果表明复发DLBCL患者的SENEX水平增加并伴随着Rb途径的激活。siRNA沉默SENEX基因后,细胞增殖能力明显降低。与对照组和NC组相比,SENEX-SiRNA组中pRb水平明显降低;与NC组相比,SENEX-SiRNA组中游离的E2F1浓度出现降低。表明SENEX基因能够促进Rb蛋白和E2F1活化,提示了 SENEX基因具有活化细胞周期开关—Rb/E2F转录调控通路的能力。结论:1.ARHGAP18蛋白和SENEX基因在复发的DLBCL患者中呈高表达;2.SENEX基因通过活化Rb/E2F1通路促进DLBCL增殖与复发。3.患者外周血中高水平的SENEX表达可能提示DLBCL复发可能,对于临床预后判断有一定的指导意义;4.SENEX基因在DLBCL发生发展中的机制研究仍有待深入,未来有望成为治疗DLBCL患者尤其是复发患者的新靶点。