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目的：为了研究RACK1缺失突变体与氯离子通道蛋白CLIC1的相互作用，运用分子克隆技术将活化蛋白激酶C受体1（RACK1）缺失突变体构建到真核表达质粒中，研究RACK1缺失突变体在真核细胞内的表达、定位及其与CLIC1蛋白的相互作用。 方法：以 pcDNA3.1-RACK1-FLAG为模板，构建真核表达质粒pcDNA3.1-RACK1(51-317)-FLAG、 pcDNA3.1-RACK1(93-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(135-317)-FLAG、 pcDNA3.1-RACK1(180-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(219-317)-FLAG；琼脂糖凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功。Western blot法检测其在 HEK293T细胞中的表达；运用免疫荧光技术了解RACK1缺失突变体在COS7细胞中的定位情况以及与CLIC1蛋白的共定位情况。免疫共沉淀法进一步探究RACK1缺失突变体蛋白与CLIC1蛋白的相互作用情况，内源性RACK1蛋白CLIC1蛋白的相互作用。 结果：成功构建了RACK1缺失突变体的真核表达质粒；Western blot法检测发现除pcDNA3.1-RACK1(219-317)-FLAG外其余突变体在HEK293T细胞的裂解液中均有表达；pcDNA3.1-RACK1(1-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(51-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(93-317)-FLAG、 pcDNA3.1-RACK1(135-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(180-317)-FLAG在HEK293T细胞的细胞沉淀中均有表达；免疫荧光实验表明，RACK1缺失突变体在COS7细胞中主要定位在胞质，细胞核中也有少量定位，与CLIC1蛋白均存在部分共定位。免疫共沉淀实验证明，内源性的 RACK1蛋白与 CLIC1蛋白存在相互作用，缺失突变体pcDNA3.1-RACK1(51-317)-FLAG、 pcDNA3.1-RACK1(93-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(135-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(180-317)-FLAG蛋白与CLIC1蛋白存在相互作用。 结论：成功构建了RACK1缺失突变体真核表达质粒，并在HEK293T细胞中成功表达；免疫荧光实验表明五个RACK1缺失突变体蛋白与CLIC1蛋白都存在部分共定位；免疫共沉淀实验进一步显示，缺失突变体及内源性 RACK1蛋白与CLIC1蛋白在体内存在相互作用。