【摘 要】
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目的:深入研究GLP-1受体激动剂类似物liraglutide对PA诱导的Kupffer细胞NAFLD模型的治疗性作用。方法:(1)分离提取C57BL/6小鼠的肝脏Kupffer细胞,随机分为三组:空白对照组(对
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目的:深入研究GLP-1受体激动剂类似物liraglutide对PA诱导的Kupffer细胞NAFLD模型的治疗性作用。方法:(1)分离提取C57BL/6小鼠的肝脏Kupffer细胞,随机分为三组:空白对照组(对照组);PA处理组(PA组);liraglutide+PA组(治疗组)。PA浓度为0.3mmol/l,liraglutide浓度为100nmol/l。(2)RT-PCR检测炎症小体相关分子NLRP3、ASC、caspase-1,炎症因子IL-1b、IL-18、TNF-a及信号通路Sirt1、PGC1α的基因表达水平;Western blot检测炎症小体相关蛋白分子NLRP3、ASC、caspase-1、Sirt1、PGC1α的蛋白水平;ELISA试剂盒检测细胞培养上清的炎症因子IL-1b、IL-18、TNF-a的水平;透射电镜观察各组细胞的线粒体的形态;线粒体膜电位检测试剂盒检测各组细胞的线粒体膜电位。结果:PA引起NLRP3、ASC、caspase-1的蛋白及mRNA表达增加,而liraglutide能够产生显著的抑制作用;较空白组相比,PA组细胞上清液中的IL-1b、IL-18、TNF-a的水平显著增高,经过liraglutide治疗后,炎症因子水平下降;透射电镜结果显示,PA处理可导致线粒体发生肿胀,线粒体嵴减少,而liraglutide处理后,该变化得到显著改善;同时,PA组线粒体肿胀越多,观察到的PA组线粒体膜电位越低,liraglutide干预后,线粒体膜电位有所逆转;进一步探索发现降低的Sirt1/PGC1α信号通路被liraglutide上调。结论:实验结果证实liraglutide能够逆转PA诱导的Kupffer细胞脂肪变,其机制可能与升高Sirt1/PGC1α水平进而改善线粒体功能有关。
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